方法名稱： |
苦丁茶—熊果酸的含量測定—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于苦丁茶中的熊果酸含量的測定 |
方法原理： |
本品粗粉加95 %乙醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，在220 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器 BT8100 高效液相色譜儀（美國Bi0tr0nic公司)，BT8200 紫外可見檢測儀（美國Bi0tr0nic公司)，C2R6A chr0mat0pac 自動積分儀（美國Bi0tr0nic公司) 色譜條件 色譜柱：Hypersil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，10 μm) ；動相：甲醇-水-磷酸二氫鈉-乙二胺（90∶10∶0.20∶0.02) ；檢測波長：220 nm；流速：0.6 mL/min；柱溫：25 ℃ |
試樣制備： |
對照品溶液制備 取熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品配制成濃度為0.2680 mg/mL熊果酸對照品溶液。 供試品溶液制備 稱取1.000 g苦丁茶粗粉，加入14 mL體積分?jǐn)?shù)為90 %乙醇-水溶液，在85 ℃水浴上回流提取2次，每次2 h，過濾除去濾渣，合并2次提取液。用20 %Na0H調(diào)節(jié)提取液的pH=9~11，除去大分子雜質(zhì)，所得濾液用10 % H2S04酸化至pH=1~2，過濾所得沉淀，水洗至中性，干燥，得到熊果酸富集物。用甲醇溶解并定容至10 mL，作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取熊果酸對照液以及苦丁茶供試品溶液各6 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算熊果酸含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
任秀蓮，周春山，魏琦峰等. 反相高效液相色譜法測定苦丁茶中的熊果酸. 光譜實驗室. 2004，21（4)：693～697 |
