方法名稱： |
卷柏類藥材—雙黃酮—HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于卷柏類藥材中雙黃酮含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品加氯仿索氏提取，再加甲醇加熱回流提取，經(jīng)液相色譜分離，在330 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 Agilent1100液相色譜儀，1100泵，1100紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器，1100色譜工作站 色譜條件 色譜柱：Elite-ODS（5 μm，150 mm×4.6 mm)；流動(dòng)相：甲醇-0.050 mol/L磷酸二氫鈉溶液系統(tǒng)，梯度洗脫，0→6min，甲醇57.5 % →70.0 %；流速：1.5 mL/min；柱溫：40 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 分別精密稱取對(duì)照品穗花杉雙黃酮5 mg、扁柏雙黃酮2 mg、銀杏雙黃酮5 mg，各置于50 mL量瓶中，加入甲醇20 mL，超聲振蕩使溶解，甲醇定容至刻度，溶液濃度分別為穗花杉雙黃酮96.4 μg/mL、卷柏雙黃酮43.8 μg/mL、銀杏雙黃酮100.8 μg/mL，作為對(duì)照品。 供試品溶液制備 樣品粉碎，過(guò)40目篩，精密稱取0.5 g，置索氏提取器中，加氯仿50 mL回流脫脂3 h，過(guò)濾，殘?jiān)鼡]凈氯仿后加入甲醇50 mL，加熱回流提取10 h，過(guò)濾，提取液濃縮，于25 mL容量瓶中甲醇定容，搖勻，即得 |
操作步驟： |
分別精密吸取穗花杉雙黃酮、扁柏雙黃酮、銀杏雙黃酮對(duì)照液以及卷柏類藥材供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算穗花杉雙黃酮、扁柏雙黃酮、銀杏雙黃酮含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
劉海青，林瑞超，馮芳等.HPLC法測(cè)定卷柏類藥材中雙黃酮成分的含量.藥物分析雜志. 2002. 22（5)： 392～395 |
