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免疫活性細胞及其腫瘤的免疫細胞學

 

 。ㄈ)惡性淋巴瘤的免疫細胞分型

  淋巴瘤分型對病人預后的估計,臨床治療有指導性意義。但這不如良惡性鑒別重要。在日常外檢中進行淋巴瘤分型,應挑選針對性強、特異性高、使用方便的標記抗體。如有條件的單位以新鮮組織冰凍切片標記、陽性率高。一般單位病理科則選用石蠟切片標記抗體。目前比較常用而效果穩(wěn)定的石蠟切片標記抗體有L26(全B,除漿細胞瘤)UCL1(全T )KP1或Mac387組織細胞標記。T淋巴瘤應用CD4與CD8標記區(qū)別輔助T或抑制T。

  以上為NHL標記分型。關(guān)于HD的R-S細胞標記。R—s 細胞的發(fā)生組織細胞至今尚未完全肯定、R—S細胞標記抗體最先應用LeuM1(CD15)抗體,它對HD—LPL—H型R—S細胞不標記。且對粒細胞、T細胞、單核/巨噬細胞,甚至上皮細胞也陽性。最近由體外培養(yǎng)的R—S細胞提取抗原制成的Ki-1McAb、對所有類型的R—S細胞均為陽性表達。但對活化的T或B淋巴細胞亦陽性。且需作冰凍切片染色。而可在石蠟切片表達的Ber—H2抗體問世,就解決了困難問題。

  (四)在惡性淋巴瘤免疫表型分析中的注意事項

  為了正確應用免疫細胞化學標記手段在惡性淋巴瘤診斷,分型等方面發(fā)揮更大的作用應注意下列問題:①免疫細胞化學在惡性淋巴瘤分析中應緊密結(jié)合組織學改變,有目的地選用高效、廣譜的抗體,淋巴瘤常用標記抗體見表12-4。因為免疫細胞化學的結(jié)果受到多種因素的影響,可以出現(xiàn)假陽性或假陰性;②為了避免因抗體標記的局限性而造成漏診,有條件的單位最好一次用同功能的幾種抗體,這樣可以起來抗體間的反應互補性,往往比單項抗體的標記率高;③標本固定要及時,應用中性福爾馬林液或B5固定液,則抗原保存要好一些。盡可能應用低壓,低溫(60以下)浸蠟,減少抗原的破壞丟失;④抗體的濃度要適當,消除背景染色。加用二甲砷酸鈉可除去背景著色。特別膜標記陽性時與背景著色很難區(qū)分。前者包繞細胞呈環(huán)狀;⑤每次染色應有陽性對照和陰性對照;⑥目前淋巴瘤的基因重排檢測技術(shù)已經(jīng)建立。特別是多聚酶鏈反應(PCR)擴增技術(shù)的應用,提供了特異(無假陽性),敏感(可檢測出1/100萬瘤細胞)快速(當天可出報告)的淋巴瘤檢測手段。作者科室已建立了該項技術(shù)。雖然其設備條件要求比較高?勺鳛橐呻y、早期、化療后殘留病灶病例的確診。

表12-4 淋巴瘤常用標記抗體

CD 常用名稱 抗原
分子量(kD) 反應細胞
CD1 T6,OKT6,Leu6 45 胸腺細胞/Langerhans細胞
CD2 T11,OKT11,Leu5 50 全T(E花結(jié)受體)
CD3 T3,OKT3,Leu4 19~29 全T(T受體相關(guān))
CD4 T4,OKT4,Leu3 55 T輔助(NHc II類)
CD5 T1,OKT4,Leu1 67 全T,偶B
CD6 T12,TU33 120 全T,偶B
CD7 CDLeu9,TU14,EA1 41 全T
CD8 T8,OKT8,Leu2 32 T抑制(TMHc I類)
CD9 J2,BA2 24 T,B,髓細胞
CD10 J5,BA3,ViLA1 100 前,B前,生發(fā)中心(CALLA)
CD11 MO1,E11,MY8 94~155 髓細胞,單核細胞
CD13 MY7(MCS—2 ) 160 髓細胞,單核細胞
CD14 Mo2,MY4,UCHM1 55 髓細胞,單核細胞
CD15 LeuM1※,,anti X-Hapten - 粒細胞,單核細胞,R-S細胞,上皮細胞
CD19 B4 95 全B(不包括漿細胞)
CD20 B1 35 全B(不包括漿細胞)
CD21 B2 145 生發(fā)中心,套區(qū)和周圍血B濾泡樹突細胞
CD22 Leu14(To15),SHCL1 135 全B
CD23 TU1,Blast2 45  套區(qū),?生發(fā)中心B,不包括周圍血
CD24 BA1 45,55,65  全B,粒細胞,漿細胞
CD25 TAC  55 活化T和B(IL2受體)
CD30 Ki—1  90~110 R-S細胞,活化T和B
CD33 MX9  67 髓細胞,單核細胞
CD34 MY10,3C5  115 成髓細胞
CD45 LCA,T29/33, PD7/26  220 白血細胞共同抗原(T,B,M)
CD45R UCHL1   全T
  X4KB5   全B
- TdT - 前B和前T,皮質(zhì)胸腺細胞
- L26   全B
- HLA—DR (Ia-Like) - 全B(不包括漿細胞)活化T(MHc II 類)

  ※可用石蠟切片標記的McAb

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