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免疫活性細(xì)胞及其腫瘤的免疫細(xì)胞學(xué)

 

 。ㄈ)惡性淋巴瘤的免疫細(xì)胞分型

  淋巴瘤分型對(duì)病人預(yù)后的估計(jì),臨床治療有指導(dǎo)性意義。但這不如良惡性鑒別重要。在日常外檢中進(jìn)行淋巴瘤分型,應(yīng)挑選針對(duì)性強(qiáng)、特異性高、使用方便的標(biāo)記抗體。如有條件的單位以新鮮組織冰凍切片標(biāo)記、陽性率高。一般單位病理科則選用石蠟切片標(biāo)記抗體。目前比較常用而效果穩(wěn)定的石蠟切片標(biāo)記抗體有L26(全B,除漿細(xì)胞瘤)UCL1(全T )KP1或Mac387組織細(xì)胞標(biāo)記。T淋巴瘤應(yīng)用CD4與CD8標(biāo)記區(qū)別輔助T或抑制T。

  以上為NHL標(biāo)記分型。關(guān)于HD的R-S細(xì)胞標(biāo)記。R—s 細(xì)胞的發(fā)生組織細(xì)胞至今尚未完全肯定、R—S細(xì)胞標(biāo)記抗體最先應(yīng)用LeuM1(CD15)抗體,它對(duì)HD—LPL—H型R—S細(xì)胞不標(biāo)記。且對(duì)粒細(xì)胞、T細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞,甚至上皮細(xì)胞也陽性。最近由體外培養(yǎng)的R—S細(xì)胞提取抗原制成的Ki-1McAb、對(duì)所有類型的R—S細(xì)胞均為陽性表達(dá)。但對(duì)活化的T或B淋巴細(xì)胞亦陽性。且需作冰凍切片染色。而可在石蠟切片表達(dá)的Ber—H2抗體問世,就解決了困難問題。

  (四)在惡性淋巴瘤免疫表型分析中的注意事項(xiàng)

  為了正確應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記手段在惡性淋巴瘤診斷,分型等方面發(fā)揮更大的作用應(yīng)注意下列問題:①免疫細(xì)胞化學(xué)在惡性淋巴瘤分析中應(yīng)緊密結(jié)合組織學(xué)改變,有目的地選用高效、廣譜的抗體,淋巴瘤常用標(biāo)記抗體見表12-4。因?yàn)槊庖呒?xì)胞化學(xué)的結(jié)果受到多種因素的影響,可以出現(xiàn)假陽性或假陰性;②為了避免因抗體標(biāo)記的局限性而造成漏診,有條件的單位最好一次用同功能的幾種抗體,這樣可以起來抗體間的反應(yīng)互補(bǔ)性,往往比單項(xiàng)抗體的標(biāo)記率高;③標(biāo)本固定要及時(shí),應(yīng)用中性福爾馬林液或B5固定液,則抗原保存要好一些。盡可能應(yīng)用低壓,低溫(60以下)浸蠟,減少抗原的破壞丟失;④抗體的濃度要適當(dāng),消除背景染色。加用二甲砷酸鈉可除去背景著色。特別膜標(biāo)記陽性時(shí)與背景著色很難區(qū)分。前者包繞細(xì)胞呈環(huán)狀;⑤每次染色應(yīng)有陽性對(duì)照和陰性對(duì)照;⑥目前淋巴瘤的基因重排檢測技術(shù)已經(jīng)建立。特別是多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用,提供了特異(無假陽性),敏感(可檢測出1/100萬瘤細(xì)胞)快速(當(dāng)天可出報(bào)告)的淋巴瘤檢測手段。作者科室已建立了該項(xiàng)技術(shù)。雖然其設(shè)備條件要求比較高?勺鳛橐呻y、早期、化療后殘留病灶病例的確診。

表12-4 淋巴瘤常用標(biāo)記抗體

CD 常用名稱 抗原
分子量(kD) 反應(yīng)細(xì)胞
CD1 T6,OKT6,Leu6 45 胸腺細(xì)胞/Langerhans細(xì)胞
CD2 T11,OKT11,Leu5 50 全T(E花結(jié)受體)
CD3 T3,OKT3,Leu4 19~29 全T(T受體相關(guān))
CD4 T4,OKT4,Leu3 55 T輔助(NHc II類)
CD5 T1,OKT4,Leu1 67 全T,偶B
CD6 T12,TU33 120 全T,偶B
CD7 CDLeu9,TU14,EA1 41 全T
CD8 T8,OKT8,Leu2 32 T抑制(TMHc I類)
CD9 J2,BA2 24 T,B,髓細(xì)胞
CD10 J5,BA3,ViLA1 100 前,B前,生發(fā)中心(CALLA)
CD11 MO1,E11,MY8 94~155 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞
CD13 MY7(MCS—2 ) 160 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞
CD14 Mo2,MY4,UCHM1 55 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞
CD15 LeuM1※,,anti X-Hapten - 粒細(xì)胞,單核細(xì)胞,R-S細(xì)胞,上皮細(xì)胞
CD19 B4 95 全B(不包括漿細(xì)胞)
CD20 B1 35 全B(不包括漿細(xì)胞)
CD21 B2 145 生發(fā)中心,套區(qū)和周圍血B濾泡樹突細(xì)胞
CD22 Leu14(To15),SHCL1 135 全B
CD23 TU1,Blast2 45  套區(qū),?生發(fā)中心B,不包括周圍血
CD24 BA1 45,55,65  全B,粒細(xì)胞,漿細(xì)胞
CD25 TAC  55 活化T和B(IL2受體)
CD30 Ki—1  90~110 R-S細(xì)胞,活化T和B
CD33 MX9  67 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞
CD34 MY10,3C5  115 成髓細(xì)胞
CD45 LCA,T29/33, PD7/26  220 白血細(xì)胞共同抗原(T,B,M)
CD45R UCHL1   全T
  X4KB5   全B
- TdT - 前B和前T,皮質(zhì)胸腺細(xì)胞
- L26   全B
- HLA—DR (Ia-Like) - 全B(不包括漿細(xì)胞)活化T(MHc II 類)

  ※可用石蠟切片標(biāo)記的McAb

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