1 試劑
1.1 0.02mol/L溴液
取0.56g溴酸鉀,加3g溴化鉀,加蒸餾水溶解成1000ml。
1.225%碘化鉀溶液
取碘化鉀25g,加蒸餾水溶解成100ml。
1.3 標準0.02mol/L硫代硫酸鈉溶液
取標準0.1mol/L硫代硫酸鈉溶液準確稀釋5倍。
1.46 mol/L鹽酸溶液
1.5 淀粉指示劑
取可溶性淀粉0.5g,加蒸餾水5ml,攪勻后,緩緩傾入100ml的沸水中,隨加隨攪拌,煮沸,至適成稀薄的半透明液,放置,俟沉淀,傾取上層清液(配制時可加適當?shù)姆栏瘎?。
1.60.17 mol/L硫酸鋅溶液
取硫酸鋅5g加蒸餾水溶解成100ml。
1.7 飽和氫氧化鋇溶液
取氫氧化鋇[Ba(OH)2·8H2O]5.6g,加蒸餾水溶解成100ml。
1.8 0.5%酚酞指示劑
取酚酞0.5g,加乙醇100ml,使溶解即得。
2 操作
2.1 菌苗類樣品
精確量取樣品1ml于碘瓶中,加入蒸餾水約50ml,精確加入0.02mol/L溴液15~25ml(樣品含苯酚量0.3%~0.5%加25ml,小于0.3%則加15ml),沿瓶壁加入鹽酸(6molquanxiangyun.cn/zhicheng//L)10ml,搖勻,密塞,在暗處置30分鐘后,加25%碘化鉀2ml于碘瓶頸口,稍啟瓶塞,使流下,密塞,搖勻。以少量蒸餾水洗瓶頸,用標準0.02mol/L硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淺黃色,加淀粉指示劑約0.5ml,滴定至藍色消失。同時做空白試驗。
2.2 人胎盤血丙種球蛋白及疫苗類樣品
精密量取除蛋白(方法同蛋白含量測定鎢酸除蛋白法)后濾液5ml于碘瓶中,其余操作同2.1項。
2.3 人胎盤組織液
精確量取樣品5ml于50ml容量瓶內(nèi),加適量蒸餾水,加0.5%酚酞指示劑2滴,加5%硫酸鋅溶液2ml,飽和氫氧化鋇溶液約2.5ml(加至溶液呈粉紅色),加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,放置30分鐘,過濾。精確量取濾液5ml于碘瓶中,其余操作同2.1項。
3 計算
3.1 菌苗類樣品
苯酚含量%(g/ml)=(空白滴定數(shù)-樣品滴定數(shù))×硫代硫酸鈉mol/L×1.569
3.2 人胎盤血丙種球蛋白(或人胎盤組織液)及疫苗類樣品
苯酚含量%(g/ml)=(空白滴定數(shù)-樣品滴定數(shù))×硫代硫酸鈉mol/L×1.569×2
附注
1.蛋quanxiangyun.cn/shiti/白類制品由于除蛋白后濾液仍含有小分子物質(zhì),對苯酚含量測定有干擾,使結果偏高,邊緣制品可用蒸餾法,取除蛋白濾液5ml于凱氏蒸餾器內(nèi),接受液為0.02mol/L溴液15~25ml,蒸餾約20分鐘后其余操作同上。
2.可做限度測定。