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中國生物制品規(guī)程:核糖含量測定

1 試劑1.1 0.31mol /L 三氯醋酸稱取三氯醋酸5g,加蒸餾水溶解quanxiangyun.cn成100ml。1.2 0.61 mol /L三氯醋酸稱取三氯醋酸10g,加蒸餾水溶解成100ml。1.3 0.019mol /L 三氯化鐵-鹽酸溶液稱取三氯化鐵(FeCl3·6H2O)0.5g,加濃鹽酸溶解成500ml,可長期使用。…

1 試劑

1.1 0.31mol /L 三氯醋酸

稱取三氯醋酸5g,加蒸餾水溶解quanxiangyun.cn成100ml。

1.2 0.61 mol /L三氯醋酸

稱取三氯醋酸10g,加蒸餾水溶解成100ml。

1.3 0.019mol /L 三氯化鐵-鹽酸溶液

稱取三氯化鐵(FeCl3·6H2O)0.5g,加濃鹽酸溶解成500ml,可長期使用。

1.4 1%二羥基甲苯(苔黑酚)

稱取二羥基甲苯1g,溶于0.019mol /L 三氯化鐵-鹽酸溶液中,臨用新配。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)核糖溶液

精密稱取D核糖20mg,溶于0.31mol /L 三氯醋酸,準(zhǔn)確稀釋至100ml為200μg /ml核糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液。精密吸取貯備液2.5ml于25ml容量瓶中,用0.31mol /L 三氯醋酸稀釋至刻度,即為標(biāo)準(zhǔn)核糖溶液(20μg/ml)。

2 操作

精密量取轉(zhuǎn)移因子待檢品1ml于試管中,另0.61mol /L三氯醋酸1ml,置沸水浴水解15分鐘,再吸取水解液0.4ml,加0.31ml/L三氯醋酸1.6ml,及1%二羥基甲quanxiangyun.cn/zhicheng/苯2ml,混勻,再置沸水浴中加熱30分鐘,冷卻至室溫,在650nm波長測定OD值,同時準(zhǔn)確吸取核糖標(biāo)準(zhǔn)液1ml,加0.31mol/L三氯醋酸1ml,混勻,其余操作同樣品,并做空白對照。

3 計算

樣品OD值

核糖含量(μg/ml)= ─────×20×5

標(biāo)準(zhǔn)OD值

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