公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN101054596A
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公開(kāi)(公告)日
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2007.10.17
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN200710027365
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申請(qǐng)日期
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2007.04.03
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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治療過(guò)表達(dá)原癌基因neu/erbB2惡性腫瘤的重組腺病毒
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/861(2006.01)I
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/861(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;C12N15/28(2006.01)I;C07K14/525(2006.01)I;C07K16/18(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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王尚武
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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王尚武
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地址
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523808廣東省廣州市廣州國(guó)際企業(yè)孵化器A區(qū)610房
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種共表達(dá)原癌基因neu/erbB2的人源化單克隆抗體單鏈可變區(qū)和Mda-7的重組腺病毒。本發(fā)明使用的腺病毒載體為Stratagene公司的產(chǎn)品AdEasy-1載體,為E1和E3區(qū)缺失的腺病毒載體。 本發(fā)明構(gòu)建的表達(dá)盒由CMV動(dòng)子、原癌基因neu/erbB2的人源化單克隆抗體單鏈可變區(qū)、內(nèi)部核糖體結(jié)合位點(diǎn)(IRES)片段、Mda-7和SV40多聚腺嘌呤組成,其主要特征為: a).原癌基因neu/erbB2的人源化單克隆抗體僅由抗體可變區(qū)構(gòu)成; b).原癌基因neu/erbB2的人源化單克隆抗體可變區(qū)序列中,輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)通過(guò)氨基酸多肽-G-G-G-G-G-S-(GS1)連結(jié),在其N(xiāo)-末端以?xún)?nèi)切酶Nhe1和C-末端以?xún)?nèi)切酶Not1片段拼接于pIRES質(zhì)粒上游; c).人Mda-7的第72位氨基酸由Ala突變成Val,其他氨基酸組成及其排列順序不變; d).Mda-7基因在其N(xiāo)-末端以?xún)?nèi)切酶Smal和C-末端以?xún)?nèi)切酶Xba1片段拼接于pIRES質(zhì)粒下游; 經(jīng)重組后,該表達(dá)盒位于腺病毒載體的E1缺失區(qū)。該重組腺病毒具有共表達(dá)neu/erbB2的人源化單克隆抗體單鏈可變區(qū)和Mda-7的作用,因而具有更強(qiáng)細(xì)胞凋亡功能、抗癌譜更廣的生物功能。
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摘要
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本發(fā)明敘述了一種構(gòu)建表達(dá)neu/erbB2原癌基因人源化單抗可變區(qū)和Mda-7/IL-24的表達(dá)盒結(jié)構(gòu)的重組腺病毒的方法及其用途和意義,其表達(dá)盒結(jié)構(gòu)主要特征為1)neu/erbB2原癌基因人源化單抗可變區(qū);2)Mda-7/IL-24為206個(gè)氨基酸組成全長(zhǎng)基因片段,其中第72位氨基酸Ala轉(zhuǎn)換為Val;3)通過(guò)內(nèi)部核糖體結(jié)合位點(diǎn)(IRES)將neu/erbB2原癌基因人源化單抗可變區(qū)和Mda-7基因連接;3)、該重組腺病毒是復(fù)制缺陷型的血清A5型腺病毒。該新型腺病毒具有共表達(dá)二種抗癌基因,即neu/erbB2原癌基因人源化單抗可變區(qū)和Mda-7基因,其產(chǎn)物具有更強(qiáng)細(xì)胞凋亡生物功能,但對(duì)正常細(xì)胞不會(huì)造成損傷。因此,在過(guò)表達(dá)neu/erbB2原癌基因的惡性腫瘤的基因治療中將具有重要意義。
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國(guó)際公布
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