方法名稱： |
燈盞細(xì)辛--野黃芩苷含量測定--HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
燈盞細(xì)辛藥材中野黃芩苷的含量測定 |
方法原理： |
燈盞細(xì)辛經(jīng)50%乙醇超聲提取，提取液水溶解后以乙酸乙酯萃取，水層用流動(dòng)相（乙腈-水-四氫呋喃-磷酸，15：85：1.5：0.1)溶解，經(jīng)液相色譜儀分離，在335nm處測定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 LC-10AD高效液相色譜儀，SPD-10A紫外可見檢測器，CLASS-LC10色譜工作站； 色譜條件 色譜柱：Hypersil-ODS 2(200mm×4.6mm,5μm)；流動(dòng)相：乙腈-水-四氫呋喃-磷酸（15：85：1.5：0.1)；流速：0.8ml/min；檢測波長：335nm；柱溫：30℃。 |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 精密稱定野黃芩苷對照品適量置50ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，制成濃度為0.224mg/ml的溶液，搖勻，即得。 供試品溶液的制備 取干燥的藥材粉末約0.5g，精密稱定，置干燥錐形瓶中，用50%乙醇10ml超聲提取3次，每次20min，濾過，合并濾液，減壓揮干，用水30ml溶解并稱量轉(zhuǎn)移至125ml分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，棄去有機(jī)層，收集水層減壓揮干，用流動(dòng)相溶解并定量轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，定容，搖勻，即得。 |
操作步驟： |
分別精密對照品溶液與供試品溶液20μl，按上述色譜條件注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，外標(biāo)法計(jì)算樣品中燈盞乙素的含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
林燕芝,陳曉輝,唐星等.RP-HPLC測定燈盞細(xì)辛中野黃芩苷的含量.藥物分析雜志.2005,25(5):594-596 |
