方法名稱： |
金蕎麥飲片—表兒茶素的含量測(cè)定—HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于金蕎麥飲片中表兒茶素含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品粉末分別加流動(dòng)相和乙醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，電化學(xué)檢測(cè)法測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 WatersAlliance 高效液相色譜儀，Waters 2465安培檢測(cè)器，Emp0wer色譜工作站（Waters公司，美國(guó)) 色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18 （416 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇—0.1 m0l/L磷酸鹽緩沖液（15∶85，含0.02 m0l/L的氯化鈉，pH 2.15)（原兒茶酸)；甲醇—0.1 m0l/L 磷酸鹽緩沖液（1:3，含0.02 m0l/L 的氯化鈉，pH 2.15)（原兒茶醛)；流速：1.0 mL/min；電極：參比電極為ISAAC（in—situ /AgCl)，工作電極為玻碳電極，輔助電極為鉑電極；檢測(cè)電位：800 mV（原兒茶酸)；600 mV（原兒茶醛)；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取適量表兒茶素對(duì)照品，用甲醇配制成5.82 μg/mL的溶液，即得；精密稱取適量原兒茶酸和原兒茶醛對(duì)照品，用流動(dòng)相溶液溶解，制成原兒茶酸0.0768 mg/mL和原兒茶醛0.0214 mg/mL的對(duì)照品溶液。 供試品溶液制備 取金蕎麥粉末約0.8 g，精密稱定，置50 mL平底燒瓶中，精密量取25 mL流動(dòng)相溶液，稱重，回流提取1 h，放冷并補(bǔ)足重量。濾過，取續(xù)濾液過0.2 μm濾膜，即得含量測(cè)定用供試品溶液；取金蕎麥粉末0.8 g，精密稱定，置50 mL平底燒瓶中，精密加入50 %乙醇25 mL，稱重，冷浸1 h，回流提取1 h，放冷并補(bǔ)足減失的重量。過0.2 μm濾膜，棄去初濾液，即得指紋圖譜用供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取表兒茶素對(duì)照液以及金蕎麥供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算表兒茶素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
楊濱、辛敏通、呂冬梅等.金蕎麥飲片液相色譜含量測(cè)定及指紋圖譜研究.中國(guó)中藥雜志 .2006，31（2)：117～119 |
