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附子—烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定方法—HPLC-UV-4

  
方法名稱:
  附子—烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定—HPLC-UV-4
應(yīng)用范圍:
  用于附子中烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定
方法原理:
 本品先用水提取,濃縮后,加濃水,再用乙醚提取,加入內(nèi)標(biāo)液,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm處測定,按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備    LC-10ATvp 高效液相色譜儀,包括SPD-10Avp 紫外檢測器、SIL-10Avp自動(dòng)進(jìn)樣器、CTO-10Asvp 柱溫箱、CLASS-vp 色譜工作站.

色譜條件   色譜柱: Hypersil C8 (250mm×4.6mm,5μm) ;流動(dòng)相: 甲醇-0.04mol / L三乙胺(50∶50,磷酸調(diào)節(jié)p H值至6);流速:1.0ml / min ;檢測波長:230nm;柱溫:40℃。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  分準(zhǔn)確稱取烏頭堿2.0mg 、新烏頭堿4.1mg 、次烏頭堿4.8mg,置于10ml 容量瓶中,加10 %甲醇溶液(鹽酸調(diào)節(jié)p H值至2) 溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。

內(nèi)標(biāo)溶液的制備   準(zhǔn)確稱取阿普唑侖10.2mg , 置于50ml容量瓶中, 加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。

供試品溶液的制備   稱取附子飲片50g,加水400ml,浸泡1h,回流提取1h,棉花過濾,濾渣加水400ml 再回流提取1h,過濾,合并濾液,于50℃下以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮,加濃氨水調(diào)節(jié)p H 值至10,再用乙醚20ml 提取3 次,收集乙醚層,氮?dú)獯蹈,殘(jiān)觾?nèi)標(biāo)溶液300μl,用10%甲醇溶液(鹽酸調(diào)節(jié)p H值至2) 溶解并定容至5ml,振蕩使之溶解,0.4μm 微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液10μl,供高效液相色譜法分析。
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取混合對照品溶液和供試品溶液10μL,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,測定峰面積,按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算各組分的含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:quanxiangyun.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  劉玉蘭,劉世坤,裴奇等. 高效液相色譜法測定附子中3 組分的含量. 中國藥房.2006,16(17):1255~1256
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