方法名稱: |
決明子—五種蒽醌類化合物的測定— HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于決明子中五種蒽醌類化合物(蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚)含量的測定 |
方法原理: |
本品粉碎后加95 %乙醇回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在440 nm處測定峰面積,外標法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器 Waters 600型HPLC儀(美國Waters 公司),包括:Waters 600E 泵,996 PDA二極管陣列檢測器,Millennium32色譜工作站,7725i手動進樣器,柱溫箱,在線氦氣脫氣 色譜條件 色譜柱:Symmetry C18 色譜柱(5 μm,3. 9 mm× 250 mm),Symmetry C18保護柱(5 μm,3. 9 mm×20 mm) 流動相:甲醇—0. 1 %磷酸水溶液(90∶10) 流速:0. 8 mL/min 柱溫:25 ℃ |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取干燥至恒重的蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚適量,分別用甲醇溶解于10 mL量瓶中,使每1mL溶液含大黃素104 μg、大黃酚116 μg、大黃素甲醚113 μg、大黃酸106 μg、蘆薈大黃素170 μg。分別吸取上述溶液2 mL、2 mL、2 mL、2 mL、1 mL于10 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,即得混合對照品溶液。 |
操作步驟: |
分別精密吸取混合對照液以及游離、總蒽醌類供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
于超等. HPLC 法測定不同產(chǎn)地決明子中五種蒽醌類化合物. 基層中藥雜志.2002,16(2):8~10 |