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決明子—五種蒽醌類化合物的測定方法—HPLC

  
方法名稱:
  決明子—五種蒽醌類化合物的測定— HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于決明子中五種蒽醌類化合物(蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚)含量的測定
方法原理:
 本品粉碎后加95 %乙醇回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在440 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器  Waters 600HPLC儀(美國Waters 公司),包括:Waters 600E 泵,996 PDA二極管陣列檢測器,Millennium32色譜工作站,7725i動進樣器,柱溫箱,在線氦氣脫

色譜條件

色譜柱:Symmetry  C18 色譜柱(5 μm,3. 9 mm× 250 mm),Symmetry  C18保護柱(5 μm,3. 9 mm×20 mm)

流動相:甲醇—0. 1 %磷酸水溶液(90∶10)

流速:0. 8 mL/min

柱溫:25 ℃

檢測波長:440 nm
試樣制備:
 

對照品溶液制備    精密稱取干燥至恒重的蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚適量,分別用甲醇溶解于10 mL量瓶中,使每1mL溶液含大黃素104 μg、大黃酚116 μg、大黃素甲醚113 μg、大黃酸106 μg、蘆薈大黃素170 μg。分別吸取上述溶液2 mL、2 mL2 mL、2 mL、1 mL10 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,即得混合對照品溶液。

    供試品溶液制備    1)決明子藥材經(jīng)干燥、粉碎后過60目篩,精密稱取約1 g,置索氏提取器中,用95 %乙醇100 mL提取至提取液完全無色,提取液經(jīng)減壓回收溶劑至干,殘渣用甲醇溶解,于25 mL量瓶中,稀釋至刻度,即得游離蒽醌類成分供試品溶液。2)精密稱取同一批號藥材約1 g,置索氏提取器中,用95 %乙醇100 mL提取至完全無色,提取液經(jīng)減壓回收溶劑,殘渣加2 mol/L鹽酸40 mL回流水解3 h,然后用80 mL氯仿分4次回流萃取,每次20 mL,回收氯仿,殘渣用甲醇溶解至25 mL量瓶中,稀釋至刻度,即得總蒽醌類成分供試品溶液。
操作步驟:
  分別精密吸取混合對照液以及游離、總蒽醌類供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:quanxiangyun.cn)
備注:
 
參考文獻:
  于超等. HPLC 法測定不同產(chǎn)地決明子中五種蒽醌類化合物. 基層中藥雜志.2002,16(2):8~10
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