方法名稱： |
桂林西瓜霜噴霧劑—鹽酸小檗堿的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定桂林西瓜霜噴霧劑中鹽酸小檗堿的含量。 本方法適用于中成藥桂林西瓜霜噴霧劑。 |
方法原理： |
供試品置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇后，超聲提取，濾過,續(xù)濾液用乙醇稀釋后用流動(dòng)相制成供試品溶液，吸取20μL進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)345nm處檢測(cè)鹽酸小檗堿的吸收值，計(jì)算出其含量 |
試劑： |
1.乙腈（色譜純) 2.甲醇（色譜純) 3.磷酸二氫鈉 |
儀器設(shè)備： |
1儀器 1.1高效液相色譜儀 1.2色譜柱 Inertsil-ODS-3（5μm，250mm×4.6mm) 1.3紫外吸收檢測(cè)器 2色譜條件 2.1流動(dòng)相：甲醇 乙腈 0.05mol/L磷酸二氫鈉 = 20 30 50 2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：345nm |
試樣制備： |
1.稱取供試品 精密稱取供試品內(nèi)容物4g。 2.對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋到刻度，搖勻，精密量取5mL,置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得每1mL含鹽酸小檗堿40.76μg的對(duì)照品溶液。 3.標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密吸取對(duì)照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于10mL量瓶，分別用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。 4.供試品溶液的制備 將上述供試品置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲處理30min，時(shí)時(shí)振搖，放冷；再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，放置，濾過。精密量取續(xù)濾液5mL,置入50mL量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻；精密量取2mL置10mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取5.3項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)345nm處測(cè)定鹽酸小檗堿的吸收值，以鹽酸小檗堿峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)照品溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2.供試品的測(cè)定 取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)345nm處測(cè)定鹽酸小檗堿的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
金陽. HPLC法測(cè)定桂林西瓜霜噴霧劑中鹽酸小檗堿的含量.現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2004,18(2):34-35 |
