1983年澳大利亞學者Marshall等首次從胃炎患者的胃粘膜中分離出一種螺旋彎曲桿菌,引起了廣泛關(guān)注和研究。由于檢測手段的不斷進步和發(fā)展,提高了臨率診治胃十二指腸疾病的水平,更新了人們對胃十二指腸疾病的傳統(tǒng)觀念和認識。
該菌從形態(tài)學上看,在體內(nèi)呈螺旋桿狀,在體外培養(yǎng)呈彎桿狀,故被正式命名為幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)。1990年8月的悉尼國際胃腸會議肯定了Hp與慢性胃炎(CG)消化性潰瘍(PU)的關(guān)系。實驗證明,此菌的存在與病變程度有密切聯(lián)系。在一些胃十二指腸疾病中Hp感染率很高,檢出率為58%~100%。有人通過對胎兒、新生兒、嬰幼兒、正常人免疫學及細菌學的研究認為,人體胃粘膜出現(xiàn)Hp是外源性感染方式,人與人及人與動物之間的傳染是Hp的可能傳播途徑。城市人口感率高于農(nóng)村人口,澳大利亞土著人的Hp感染率顯著低于隨機挑選的獻血員。揭示密切的社會接觸有利于Hp感染的流行。Hp感染的致病機理至今尚未完全闡明。賈博琦認為,可能是隱性感染過程,即在Hp浸潤下,胃粘膜充血、水腫造成Hp生長的適宜環(huán)境,Hp借機侵入粘膜下層生長繁殖,并逐漸發(fā)展為慢性炎癥或潰瘍。張振華等認為,Hp對人感染過程分為3個價段:①Hp借其螺旋狀菌體及其結(jié)構(gòu)的特征,穿透粘膜表面的不溶性粘液層;②借Hp表面菌毛樣網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)與胃粘膜上皮表面相應的受體結(jié)合,在胃壁穩(wěn)定持續(xù)地定居;③再由Hp的LPS或其它的細胞毒素引起胃粘膜非特異性炎癥。在此基礎(chǔ)上再加上胃酸、胃蛋白酶的作用造成炎癥或潰瘍。Morgan通過對Hp的流行病學、細菌學、病理學、病因?qū)W、臨床診斷學與藥物治療等方面進行的研究證實45%的Hp有細胞損害作用。Hp含有多種生物化學損傷因子:①Hp含類脂多糖脂肪酸A,它具有Gram陰性菌的內(nèi)毒素特性;②有豐富的尿素酶活性,它分解尿素成NH4+與CO2,而NH4+可破壞粘膜屏障,使跨膜電位發(fā)生改變,引起細胞通透性增加,H+逆相擴散,產(chǎn)生糜爛和潰瘍。③Hp有蛋白分解酶,將高分子的粘液分解為低分解為低分子物,使粘度減低,不能阻止H+逆相擴散。④Hp感染染致免疫反應,在急性活動期,局部出現(xiàn)炎癥細胞浸潤(中性多核為主),在慢性期,局部出現(xiàn)淋巴細胞,漿細胞浸潤和SIgA及SC為主。⑤Hp增強活性氧的生成而介導粘膜損害。從組織學觀點看Hp感染加重了洗動性胃炎、中性粒細胞浸潤、破壞腺體導致萎縮性胃炎。也可損害胃排空而促進潰瘍形成?傊瓾p的存在及其致病性已不容置疑,關(guān)鍵在于提高對Hp的檢測水平,針對病因進行有效治療并通過對Hp的臨測指導臨床治療。
Hp的檢測方法目前已有尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)、活檢標本切片染色、直接涂片染色、14C呼試驗及免疫學方法等各種測定法。權(quán)衡利弊各有優(yōu)缺點。
2.1 尿素酶試驗
該試驗是所有檢測手段中最為簡便迅速的一種方法,在胃鏡檢查同時進行,敏感性和特異性分別達91%和100%時,數(shù)分鐘即可做出診斷。檢查結(jié)果與直接涂片法、分離培養(yǎng)法、組織病理學結(jié)果一致或近似;顧z標本的尿素酶活性主要與感染的數(shù)量多少有關(guān),量少時可能造成假性反應,而其它產(chǎn)生尿素酶的細菌也可能造成假陽性,但仍不失為一種最初檢測Hp感染的有效手段。
2.2 細菌培養(yǎng)
胃粘膜組織的細菌培養(yǎng)是診斷Hp感染的最可靠方法,往往做為驗證其它檢測手段的“金標準”。但不少因素可能會影響Hp的培養(yǎng)而致假陰性。如:胃粘膜組織中的www.med126.comHp的數(shù)量過少、細菌繁殖能力差等。
2.3 活檢標本切片染色
將胃粘膜活檢組織標本用100%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋、切片染色。染色的方法有很多種,主要有Warth-Starry(W-S)染色,改良Giemsa染色,Gresyefast,HE和熒光染色,其中(W-S)染色效果最好,細菌清晰易辨,特異性和敏感性幾乎均達100%。但該法繁瑣且需一定技術(shù)。此外HE染色法既可供組織學運用又可檢查Hp。也可做為一種常規(guī)檢測方法。Langdale-Brown等報道用吖啶橙熒光染色,Hp易辨認,且方法簡單、快速,尤其在Hp量少時優(yōu)于W-S和Giemsa染色,不易漏診。
2.4 直接涂片染色
Pinlard用相差顯微鏡直接檢查涂于玻璃片上的胃粘膜查Hp,敏感性達100%。
2.513C14C呼吸試驗
有人利用Hp產(chǎn)生的尿素酶能分解尿素的原理,將胃內(nèi)用核素標記的尿素分解產(chǎn)生CO2和NH2,CO2被吸收后經(jīng)肺排出,如果胃粘膜有Hp存在,則呼出氣中就有核素標記的CO2出現(xiàn)。檢測Hp的敏感性和特異性分別達到100%和88%,Hp清除后14CO2呼出減少。Ormand等發(fā)現(xiàn)收集服用核素標記quanxiangyun.cn/shouyi/的尿素后20min的呼氣體即可有效地檢測Hp感染。
2.6 免疫學方法
佐貫等采用乳膠凝集試驗檢測血中抗HpIgG抗體,并與組織培養(yǎng)法和鏡檢法進行對照,血中抗Hp抗體與粘膜內(nèi)Hp檢出一致率為73.1%,特異性為60%~100%,敏感度為81.3%,對Hp感染的篩選診斷具有一定的實用價值。Rathbone等用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定73例經(jīng)胃鏡檢查并活檢確診的患者血清Hp抗體,發(fā)現(xiàn)其敏感性和特異性分別達到93%和97%。Engstrand等建立了檢測Hp的單克隆抗體方法,為診斷Hp感染提供了更為特異的方法。張啟波等利用初步純化的Hp的尿素酶為抗原對120例病人的血清抗Hp抗體進行了ELISA測定,對照細菌培養(yǎng)等方法顯示敏感為95%,特異性為91%。吉林市第222醫(yī)院用血清免疫熒光方法診斷Hp感染,顯示很高的敏感性。浙江醫(yī)科大學用親和素一生物素(ABC)法檢測活檢組中的Hp抗原,可顯著提高診斷的靈敏性。
2.7 其它
Sehneider等報道,讓患者吞入系線膠囊以收集胃內(nèi)粘液,再通過涂片和尿素酶試驗檢測粘液內(nèi)的Hp,發(fā)現(xiàn)其特異性、敏感性也很高。郎大裕等用一種添加了尿素的pH指示劑的酚紅,使Hp染色,通過內(nèi)鏡觀察Hp在人胃內(nèi)的分布情況,應用本法的30例胃潰瘍患者中26例色素撒布后立即可以見到發(fā)紅現(xiàn)象。全部病例都可在發(fā)紅的部位檢出Hp。
為克服Hp檢測中的假陽性結(jié)果,中山醫(yī)科大學與澳大利亞學者合作探討了血清學與尿素呼氣試驗診斷Hp感染的價值,在血清學試驗中對接近界限值的陽性血清再增加一個空腸彎曲菌吸收試驗,可提高血清學診斷的特異性,呼氣試驗的敏感性為98.7%,特異性為97.1%,并能準確測定Hp陰轉(zhuǎn)及復發(fā)或再感染,可望成為抗Hp治療的藥物篩選及療效監(jiān)測的重要手段。Megraud等用DNA雜交技術(shù)檢測Hp,從理論上講其特異性好,有發(fā)展前途,但目前尚不能應用于活檢標本的Hp檢測。
綜上所述,Hp感染與胃十二指腸疾病的關(guān)系已證明,隨著醫(yī)學研究的不斷深入Hp的檢查方法也將不斷取得突破性進展。