公開(公告)號 | CN1143893C |
公開(公告)日 | 2004.03.31 |
申請(專利)號 | CN01144317.0 |
申請日期 | 2001.12.14 |
專利名稱 | 一種精氨酸酯酶的制備方法 |
主分類號 | C12N9/18 |
分類號 | C12N9/18;A61P1/16 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 周肖林;陳遠聰 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 周肖林;陳遠聰 |
地址 | 333000 江西省景德鎮(zhèn)經(jīng)公橋蛇類研究所 |
頒證日 | 2004.03.31 |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 |
代理人 | 朱黎光;張占榜 |
國省代碼 | 江西;36 |
主權(quán)項 | 一種精氨酸酯酶的制備方法,其特征是該方法包括如下步驟:步驟a:取江浙蝮蛇毒凍干粉溶于0.05Mtris-HCl,pH7.8緩沖液中,4℃下離心除去不溶物,取上清液;步驟b:上清液先經(jīng)DEAE纖維素DE-52柱層析,層析柱先用Tris-HCl緩沖液平衡后,用含NaCl的緩沖液從0至0.5M進行梯度洗脫,收集含精氨酸酯酶活性的組分,濃縮,去鹽后,進行下一步分離;步驟c:用CM-Sepharose柱層析分離,平衡液是0.05M醋酸鈉pH5.0緩沖液,洗脫液含0至0.5MNaClpH5.0的醋酸鈉緩沖液梯度洗脫,收集含精氨酸酯酶活性組分,濃縮,去鹽后再做下一步分離;步驟d:用Sephadex-75柱層析疑膠過濾分離,洗脫液為0.05MNaHCO3含0.1MNaCl溶液,收集精氨酸酯酶組分,濃縮,去鹽,凍干后得產(chǎn)品。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及從江浙蝮蛇毒中提取肝活素的方法,這種肝活素的主要成分為精氨酸酯酶,其藥理功能是降低血粘度,改善微循環(huán),對肝炎病毒感染細胞的發(fā)展有抑制作用,能促進肝功能的恢復(fù)。由于江浙蝮蛇毒中含有神經(jīng)毒素和出血毒素等有害成分,本發(fā)明的方法是利用經(jīng)過三柱層板分離純化,能將這些毒性物質(zhì)除掉,精氨酸酯酶的含量達90%以上。動物試驗表明毒性很小,試驗劑量為臨床用量的數(shù)十倍,因而可保證臨床用藥安全。 |
國際公布 |