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重組人IA-2抗原的制備方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1490332A  
公開(kāi)(公告)日 2004.04.21  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03141675.6  
申請(qǐng)日期 2003.07.17  
專利名稱 重組人IA-2抗原的制備方法  
主分類號(hào) C07K14/435  
分類號(hào) C07K14/435;C12N15/12;C12P19/34;C12P21/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海市內(nèi)分泌代謝病研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 羅敏  
地址 200025上海市瑞金二路197號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海東方易知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所  
代理人 許瑞德  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 重組人IA-2抗原的制備方法,包括步驟1:IA-2表達(dá)型重組質(zhì)粒的構(gòu)建;步驟2:IA-2重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá);步驟3:IA-2重組蛋白的分離、親和層析和透析純化;其特征在于:所述的步驟1是從胎腦中克隆人IA-2胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(包括基酸606~979)的編碼基因;以嵌套式PCR擴(kuò)增該編碼基因,實(shí)現(xiàn)Pinpoint Xa-IA-2表達(dá)型重組質(zhì)粒的構(gòu)建;所述的步驟2是將含重組質(zhì)粒的JM109菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng),得到IA-2重組蛋白;所述的步驟3是將IA-2重組蛋白經(jīng)分離、親和層析和透析純化,獲得生物素;疘A-2融合蛋白。  
摘要 重組人IA-2抗原的制備方法,包括從胎腦中克隆人IA-2胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(包括氨基酸606~979)的編碼基因;以嵌套式PCR擴(kuò)增該編碼基因,實(shí)現(xiàn)PinpointXa-IA-2表達(dá)型重組質(zhì)粒的構(gòu)建;將含重組質(zhì)粒的JM109菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng),得到IA-2重組蛋白;IA-2重組蛋白經(jīng)分離、親和層析和透析純化,獲得生物素酰化IA-2融合蛋白,可以直接作為抗原,用于IA-2抗體的鏈親和素固相酶免檢測(cè)技術(shù)。  
國(guó)際公布  
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