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一種高效表達(dá)重組蜱抗凝肽的生產(chǎn)方法

公開(公告)號(hào) CN1609115A  
公開(公告)日 2005.04.27  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200310100190.6  
申請(qǐng)日期 2003.10.17  
專利名稱 一種高效表達(dá)重組蜱抗凝肽的生產(chǎn)方法  
主分類號(hào) C07H21/00  
分類號(hào) C07H21/00;C12N15/81;C12N15/09;C07K14/435  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 北京華特森基因科技有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 鄭海發(fā);張永國;張俊;秦永發(fā)  
地址 100071北京市豐臺(tái)西路15號(hào)華北物質(zhì)供應(yīng)站院內(nèi)31號(hào)房  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一段選自下列物質(zhì)組之一的寡核苷酸序列,其可用作引物擴(kuò)增出重組蜱抗凝肽的基因序列:①P1:TCTCGAGAAAAGATGGAATAGGCTGTGTATTAAGCCTAGAAGATGGATTGATGAGT;②P2:TGGAATAGGCTGTGTATTAAGCCTAGAAGATGGATTGATGAGTGTGATAGTAATGA;③P3:CACAACCACCTTTACCGTTACGAAAATAGGCTCTTTCACCCCCTTCATTACTATCACACTC;④P4:TAAAGGTGGTTGTGATTCCTTTTGGATCTGTCCGGAAGACCATACCGGTGCTGACTAT;⑤P5:GATGCAAGCGTTGAAGCAGTCACGGTAGGAGGAGTAATAGTCAGCACCGGT。  
摘要 本發(fā)明涉及一種在酵母中高效表達(dá)重組蜱抗凝肽的方法,包括:設(shè)計(jì)引物合成重組蜱抗凝肽的編碼基因;融合于酵母表達(dá)調(diào)控元件,構(gòu)建甲醇酵母高表達(dá)工程菌;運(yùn)用甘油培養(yǎng)和誘導(dǎo)表達(dá)二步生長法,在酵母中高密度發(fā)酵表達(dá)重組蜱抗凝肽;采用超濾、離子交換、分子篩柱層析等純化技術(shù)的順序組合,大量純化回收重組蜱抗凝肽。本發(fā)明的方法能夠大量生產(chǎn)重組蜱抗凝肽,產(chǎn)品能夠達(dá)到藥用標(biāo)準(zhǔn)。  
國際公布  
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