| 公開(公告)號 | CN1250718C |
| 公開(公告)日 | 2006.04.12 |
| 申請(專利)號 | CN02153855.7 |
| 申請日期 | 2002.12.05 |
| 專利名稱 | 蝰蛇蛇毒血凝酶的層析純化方法 |
| 主分類號 | C12N9/74(2006.01)I |
| 分類號 | C12N9/74(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61P7/04(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 兆科藥業(yè)（合肥)有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 許貞玉;錢 芳;夏紅梅;李兆羿 |
| 地址 | 230088安徽省合肥市長江西路669號高新技術產業(yè)開發(fā)區(qū) |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 北京集佳知識產權代理有限公司 |
| 代理人 | 王學強 |
| 國省代碼 | 安徽;34 |
| 主權項 | 一種注射用蛇毒血凝酶的層析純化方法，其步驟包括：(1)將蝰蛇蛇毒用緩沖液溶解，離心去除沉淀；(2)將(1)中所得上清液用苯甲脒進行親和層析，再用pH7.0～9.0的tris-HCl緩沖液和NaCl溶液線性梯度洗脫，得到類凝血酶的粗溶液；(3)將(1)中所得上清液用肝素進行親和層析，再用pH7.0～9.0的tris-HCl緩沖液和NaCl溶液線性梯度洗脫，得到類凝血激酶的粗溶液；(4)濃縮類凝血酶和類凝血激酶的粗溶液，將所得類凝血酶和類凝血激酶的粗溶液分別經過陰離子交換柱層析，用pH7.0～9.0的tris-HCl緩沖液和NaCl溶液線性梯度洗脫，純化得到類凝血酶和類凝血激酶的純溶液；(5)濃縮類凝血酶和類凝血激酶的純溶液，將所得類凝血酶和類凝血激酶的純溶液分別經過凝膠過濾柱層析，用pH7.0～9.0的tris-HCl緩沖液洗脫，得到類凝血酶和類凝血激酶的精純溶液；(6)將所得類凝血酶和類凝血激酶的精純溶液按一定比例混合后得到混合液，每毫升含有1個克氏單位的血凝酶活性，再加入適量的賦形劑、穩(wěn)定劑進行過濾、灌裝、冷凍干燥、軋蓋，即獲得注射用蛇毒血凝酶成品。 |
| 摘要 | 注射用蛇毒血凝酶的純化工藝包括：蛇毒的溶解，親和層析分離得到類凝血酶和類凝血激酶的粗溶液，超濾濃縮，離子交換層析純化得到類凝血酶和類凝血激酶的純溶液，超濾濃縮，凝膠層析獲得類凝血酶和類凝血激酶的精純溶液，最后將上述類凝血酶和類凝血激酶的精純溶液按一定比例混合后，加入適量的賦形劑、穩(wěn)定劑，經過濾、灌裝、冷凍干燥、軋蓋，最終獲得注射用蛇毒血凝酶成品等工藝。本工藝采用專一性吸附劑，可以一次性地快速完成大量酶溶液的粗提制備工作，并能最大程度地收集到粗品中的有效成份，且生物活性高。所得注射用蛇毒血凝酶經動物藥效學實驗，全血凝血時間明顯縮短，肝臟切口的失血量明顯減少，多種毒素測定結果均為陰性。 |
| 國際公布 |
