公開(公告)號 | CN1285737C |
公開(公告)日 | 2006.11.22 |
申請(專利)號 | CN200410046626.2 |
申請日期 | 2004.08.03 |
專利名稱 | 硅殼納米顆粒檢測SARS病毒基因組片斷的方法 |
主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 湖南大學 |
發(fā)明(設計)人 | 譚蔚泓;王柯敏;龔 萍;何曉曉 |
地址 | 410082湖南省長沙市河西岳麓山湖南大學化學生物傳感與計量學國家重點實驗室 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 湖南兆弘專利事務所 |
代理人 | 趙 洪 |
國省代碼 | 湖南;43 |
主權項 | 一種硅殼納米顆粒檢測SARS病毒基因組片斷的方法,其特征在于檢測的具體過程為:1)、雜交:連接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片斷的硅殼磁性納米探針與含有SARS病毒基因片斷及其它非SARS病毒基因片斷的樣品進行雜交;2)、磁分離:利用硅殼磁性納米顆粒的磁性分離作用將SARS病毒基因組從混合樣品中分離和純化出來;3)、PCR擴增:以純化的SARS病毒基因組作為模板,通過一對特定的引物5’-GATGGTAATA AGATA GCTGA CAAGT-3’和5’-CATCC ACGAA TTCAT GATCA-3’進行PCR擴增,得到100bp的擴增產(chǎn)物;4)、熒光檢測,連接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片斷的硅殼熒光納米探針和擴增產(chǎn)物以及修飾有5’-Biotin-CATCCACGAATTCATGATCA ACATCCCTAT TTCT-3’cDNA片斷的玻璃芯片以一種類似三明治結構的模型進行雜交,而后用激光共聚焦熒光顯微鏡對芯片進行掃描檢測。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種硅殼納米顆粒檢測SARS病毒基因組片斷的方法,其特點是構建了用于SARS病毒檢測的三明治模型,利用自制的修飾有與SARS病毒基因組特有序列互補的cDNA片斷的硅殼磁性納米探針對含有SARS病毒基因組的樣本進行病毒基因組的提取與純化,再在聚合酶鏈式反應(PCR擴增)對病毒基因片斷進行擴增的基礎上,用修飾有與SARS病毒基因片斷特異序列互補的cDNA片斷的硅殼熒光納米探針及玻璃芯片對SARS病毒基因片斷進行檢測。本發(fā)明的檢測方法具有快捷,靈敏度和特異性高,穩(wěn)定性好的優(yōu)點。 |
國際公布 |
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