方法名稱(chēng)： |
連翹提取物-金絲桃素含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于連翹提取物中金絲桃素的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加1 %NaOH溶液索氏提取，經(jīng)液相色譜分離，在590 nm處測(cè)定峰面積，用外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 Waters 高效液相色譜儀，配有510泵，490 多功能紫外檢測(cè)器，PCM 柱溫控制Ⅰ型六通進(jìn)樣閥；HS色譜工作站（杭州英譜科技開(kāi)發(fā)有限公司) 色譜條件 色譜柱：Spherisorb C18（4.6 mm ×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-乙酸乙酯- 0.1 mol/L磷酸二氫鈉，其體積比為265：210：530；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：590 nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：10 μL |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 取對(duì)照品1.0 mg，用甲醇少量超聲波溶解，冷卻后定容至5 mL，配成金絲桃素質(zhì)量濃度為0.02 mg/mL的甲醇溶液。 供試品溶液的制備 取植物樣品于60 ℃左右烘干，棄去莖桿，研碎，過(guò)40目篩，精密稱(chēng)取樣品1.0000 g于小濾紙筒內(nèi)，于索氏提取器中先用乙醚脫脂，至乙醚層基本無(wú)色為止。用30倍原料質(zhì)量的1 %NaOH溶液在95～100 ℃沸騰狀態(tài)下浸提2 h，提取3次，合并濾液，用0.1 mol/ L HCL溶液中和濾液至pH值3為止，真空濃縮干燥即得提取物。用甲醇溶解提取物，于10 mL容量瓶中定容，過(guò)濾，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取金絲桃素對(duì)照液以及貫葉連翹供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算金絲桃素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
程存歸，孫翠榮. 野生及栽培貫葉連翹提取物中金絲桃素含量比較研究. 林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè).2004，24（4)：99~102 |
