方法名稱： |
云南紅豆杉枝葉—10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的測(cè)定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于云南紅豆杉枝葉中102去乙酰巴卡亭Ⅲ含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉用95%乙醇-乙酸乙酯( 90 ∶10)超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 HP1100高效液相色譜儀(二極管陣列檢測(cè)器、蒸發(fā)光檢測(cè)器) 色譜條件 色譜柱：C18色譜柱( 250mm×4.6 mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇2乙腈2水(5∶35∶6)；檢測(cè)波長(zhǎng)：227 nm；流速：0.8 ml/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μl。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取10-去乙酰巴卡亭Ⅲ對(duì)照品12.42mg于50 ml量瓶中，以甲醇溶解并定容，即得對(duì)照品儲(chǔ)備液(0.2435 mg/mL)，精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml，定溶于10ml的量瓶中，作為對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 取干燥、粉碎、過60目篩后的云南紅豆杉藥材枝葉10g，用95%乙醇∶乙酸乙酯( 90∶10) 150ml超聲提取30min，抽濾，提取三次，合并濾液，50℃減壓回收溶劑至濃膏，加入水∶石油醚( 1：1) 40ml萃取，去石油醚層，再加20ml石油醚萃取水層，多次萃取，直到萃取至石油醚無色，加入二氯甲烷10ml萃取水層，萃取多次，合并下層二氯甲烷萃取液，減壓蒸干，用少量甲醇溶解，拌少量的硅膠揮干后過硅膠柱，硅膠柱用氯仿濕法裝柱，分別用氯仿、氯仿∶甲醇( 97∶3) 、氯仿∶甲醇(90∶10) 進(jìn)行梯度洗脫。收集氯仿∶甲醇(97∶3) 的洗脫液，揮干，用少量甲醇溶解，定容到1 ml，微孔濾膜(0.45μm) 濾過，作為供試樣品。 |
操作步驟： |
精密吸取對(duì)照液以及供試品溶液1Oμl，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算102去乙酰巴卡亭Ⅲ含量 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
安春志，羅佳波，劉莉等. 高效液相色譜法測(cè)定云南紅豆杉枝葉中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量. 廣州醫(yī)藥.2006，37（5)：47～49 |
