方法名稱: |
西藏紅豆杉—紫杉醇的測定—HPLC-DAD |
應(yīng)用范圍: |
用于西藏紅豆杉中紫杉醇含量的測定 |
方法原理: |
本品細(xì)粉用甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm測定,外標(biāo)法計(jì)算紫杉醇的含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器設(shè)備 Agilentl100高效液相色譜儀;DAD 檢測器。 色譜條件 色譜柱:phenomenexluna C18 柱( 250×4.60mm,5um) ;柱溫:30℃;流動(dòng)相:甲醇-水( 60 :40);流速:1ml/ min;檢測波長:230nm;進(jìn)樣量:10µl。 |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品1.00mg,定容于1ml 甲醇中,稀釋得0. 100mg·ml-1濃度的甲醇溶液,作為對照品貯備液。 供試品溶液的制備 取紅豆杉各部位(大樹皮、枝樹皮、果、葉),真空干燥后粉碎,過100目篩,置于密封容器中保存精密稱取樣品2.0g,置于圓底燒瓶中,加入甲醇20ml,置于超聲清洗器中于50℃超聲振蕩提取60分鐘,甲醇液過濾,濾渣和濾紙復(fù)加20ml 甲醇,在相同條件下超聲提取40分鐘,再次過濾后,濾渣和濾紙?jiān)偌?0ml甲醇,在相同條件下超聲提取20分鐘. 合并濾液,減壓蒸干后,殘?jiān)?0ml氯仿,超聲振蕩30分鐘,過濾,取氯仿層,回收氯仿,于殘?jiān)屑由僭S甲醇,超聲萃取,甲醇液離心,上層清液以甲醇定容至1ml.葉提取物經(jīng)自制氧化鋁柱,用氯仿洗脫非極性成分后,甲醇洗脫,濃縮,以甲醇定容至1ml.定容后的甲醇液經(jīng)0.45μl濾膜過濾,即得供試品溶液。 |
操作步驟: |
精密吸取對照液以及供試品溶液1Oμl,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。計(jì)算含量。 |
附件: |
點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:quanxiangyun.cn) |
備注: |
|
參考文獻(xiàn): |
林鵬程,高東紅,馬孝賢等. 西藏紅豆杉不同部位紫杉醇含量的分布研究. 青海師專學(xué)報(bào)(教育科學(xué)).2003,(6):87~88 |