關(guān)木通-馬兜鈴酸A的含量測定方法-HPLC

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方法名稱：	關(guān)木通-馬兜鈴酸A的含量測定-HPLC
應(yīng)用范圍：	用于關(guān)木通中馬兜鈴酸A的含量測定
方法原理：	本品細(xì)粉加甲醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，在315 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：	儀器 Applied Biosystems 785A檢測器，Perkinelmer Series 2000泵，HW色譜工作站（南京千譜軟件有限公司) 色譜條件色譜柱：Nova -Pak C₁₈ （150 mm×4. 6 mm，5 μm)；流動相：甲醇-水-冰醋酸（60：39：1)；流速：1. 0 mL/min；檢測波長：315 nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20 μL
試樣制備：	對照品溶液制備精密稱定馬兜鈴酸A對照品適量，加甲醇配制成204 μg/mL的對照品儲備液，即得。供試品溶液制備 1)藥材樣品：取過40目篩的關(guān)木通藥材粉末2 g，精密稱定，用濾紙包裹后置索氏提取器中，加入甲醇200 mL，95 ℃恒溫水浴提取8 h，回收甲醇，加少量甲醇定容于25 mL量瓶中，用0.45 μm微孔濾膜過濾，精密量取續(xù)濾液1 mL，置5 mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，即得。2)水煎液樣品：精密量取復(fù)方水煎液樣品（龍膽瀉肝湯)25 mL，用0.5 mol/L NaOH溶液調(diào)pH10，氯仿萃�。�25 mL×2)，堿液用3 mol/L鹽酸溶液調(diào)pH2，然后用氯仿萃取（25 mL×3)，合并氯仿液，水浴回收氯仿，殘渣用甲醇溶解并定容于25 mL量瓶中，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。同法平行制備復(fù)方陰性提取樣品和關(guān)木通單煎液提取樣品。
操作步驟：	分別精密吸取馬兜鈴酸A對照液以及關(guān)木通藥材樣品、3種水煎液供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算馬兜鈴酸A含量。
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備注：
參考文獻(xiàn)：	蔣曄，郝福，李艷榮登. HPLC測定關(guān)木通配伍前后馬兜鈴酸A煎出量的變化.華西藥學(xué)雜志. 2007，22（1)：093～095