三妙丸－鹽酸小檗堿的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定三妙丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥三妙丸。

供試品于索氏提取器中經(jīng)乙醚加熱回流，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)�用甲醇溶解，制成供試液，點(diǎn)樣、展開，用薄層掃描儀進(jìn)行熒光掃描，于激發(fā)波長λ=365nm測量鹽酸小檗堿（C₂₀H₁₇NO₄·HCl)熒光強(qiáng)度的積分值，計(jì)算其含量。

1 乙醚

2 甲醇

3 苯

4 醋酸乙酯

5 氨水

6 異丙醇

1 儀器

1.1索氏提取器

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1mL含0.06mg的溶液，作為對照品溶液。

2.供試品溶液的制備

精密稱取供試品粉末約 1.5g，置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流 1～2小時(shí)，濾去乙醚液，殘?jiān)鼡]去乙醚，加甲醇適量，回流提取至提取液無色，將提取液（必要時(shí)適當(dāng)濃縮)轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液 1μL、對照品溶液 1μL與 3μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3展開

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以苯－醋酸乙酯－甲醇－異丙醇－濃氨試液（12：6：3：3：1)為展開劑，置用氨蒸氣與展開劑同時(shí)預(yù)飽和15分鐘的雙槽展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干。

4含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行熒光掃描，激發(fā)波長：λ=365nm， 測量供試品熒光強(qiáng)度的積分值與對照品熒光強(qiáng)度的積分值，計(jì)算。

用外標(biāo)法測定時(shí)，若對照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.325。