方法名稱:
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方法名稱: |
甘草浸膏—甘草酸的測定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測定甘草浸膏中甘草酸的含量。 本方法適用于生藥與制劑的分析。 |
方法原理: |
取甘草浸膏研細,置50mL容量瓶中,加流動相超聲提取,放冷,加流動相至刻度,搖勻,濾過,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外檢測器檢測甘草酸的吸收值,計算出其含量。 |
試劑: |
1.冰醋酸 2.甲醇(色譜純) 3.醋酸銨 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 C18柱(250×4.6mm )。 2 色譜條件 2.1 流動相:0.2mol/L醋酸銨溶液 冰醋酸溶液 甲醇=33 1 67 2.3柱溫:28℃ 2.4 流速:1.0mL/min 2.5檢測波長:250nm |
試樣制備: |
1. 對照品溶液的制備 精密稱取甘草酸銨對照品20.9mg,置50ml量瓶中,加流動相使溶解并稀釋至刻度,搖勻,得含甘草酸銨411.73μg/ml溶液(相當于甘草酸403.3μg/ml),作為對照品儲備液。 5.3 標準溶液的制備 分別精密吸取1、2、3、5、8ml于10ml容量瓶中,以流動相稀釋至刻度,搖勻,得使成含甘草酸40.33、80.66、120.99、201.65、322.64、4.033μg/ml的濃度的對照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 取甘草浸膏研細,精密稱取粉末約0.1g,置50ml容量瓶中,加流動相約40ml,超聲20min,取出,放冷,加流動相至刻度,搖勻,濾過,作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1.標準曲線的繪制 分別吸取各濃度溶液10μl注入高效液相色譜儀,測定峰面積。以甘草酸量(μg)為橫坐標,峰面積為縱坐標繪制標準曲線。的制備取續(xù)濾液,精密量取10μl注入高效液相色譜儀,測定峰面積。以外標法計算含量。 6.2 供試品的測定 精密量取10ul 注入高效液相色譜儀,測定峰面積。以外標法計算含量。用紫外檢測器測定甘草酸的吸收度,以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線,進行線性回歸,得到回歸方程。 2. 供試品的測定 精密吸取上述供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀,用紫外檢測器測定甘草酸的吸收度,計算出其含量。 |
參考文獻: |
王紫秋,雷凱琴,包冬香,HPLC法測定甘草浸膏中甘草酸的含量,浙江化工,2002,33(2):20-21 |