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含糖胃蛋白酶—胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 含糖胃蛋白酶—胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法
方法名稱:
含糖胃蛋白酶—胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法
應(yīng)用范圍:

本方法采用胃蛋白酶測定法測定含糖胃蛋白酶中胃蛋白酶的效價(jià)。

本方法適用于含糖胃蛋白酶。

方法原理:

精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個(gè)單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價(jià)。

試劑:

1. 血紅蛋白試液

2. 三氟醋酸溶液

3. 鹽酸溶液

儀器設(shè)備:

可見分光光度計(jì)

試樣制備:

1. 供試品溶液的制備

精密稱取適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.2-0.4個(gè)單位的溶液,作為供試品溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取氨酸對照品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

1.供試品的測定

取大小相同的試管6支,其中3支精密加入對照品溶液1mL,另3支精密加入供試品溶液1mL,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5分鐘,精密加入預(yù)熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5mL,搖勻,并準(zhǔn)確計(jì)時(shí),在37℃±0.5℃水浴中反應(yīng)10分鐘,立即精密加入5%三氟醋酸溶液5mL,搖勻,濾過,取續(xù)濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5mL,置37℃±0.5℃水浴中保溫10分鐘,再精密加入5%三氟醋酸溶液5mL,其中一支加供試品溶液1mL,另一支加上述鹽酸溶液1mL,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,分別作為供試品和對照品的空白對照,照紫外-可見分光光度法,在275nm的波長處測定吸光度,按下列公式計(jì)算,即得。

參考文獻(xiàn):

中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.390。

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