實(shí)驗(yàn)性質(zhì):綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí):4學(xué)時(shí)
實(shí)驗(yàn)分組人數(shù):4~5人
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/b>
1 復(fù)制實(shí)驗(yàn)性肺水腫; 通過實(shí)驗(yàn)了解肺水腫的表現(xiàn),加深對水腫發(fā)生機(jī)制的認(rèn)識;2 通過本實(shí)驗(yàn),加強(qiáng)與缺氧、呼吸衰竭等內(nèi)容的聯(lián)系。
(二)實(shí)驗(yàn)材料
1. 實(shí)驗(yàn)動物 家兔
2.實(shí)驗(yàn)儀器
(1) BL-420E+系統(tǒng)⑵ 天平 ⑶ 嬰兒稱 ⑷ 聽診器
3. 實(shí)驗(yàn)用藥 1%普魯卡因、肺素溶液(1250/ml)、20%磺基水楊酸溶液,生理鹽水。
4. 器械 吸管、載玻片、濾紙若干、氣管插管、quanxiangyun.cn/sanji/動、靜脈插管,急性手術(shù)器械一中國衛(wèi)生人才網(wǎng)套(動脈夾2個(gè)、手術(shù)刀1把、止血鉗10把、組織剪刀1把、線剪1把、眼科剪刀1把、剪毛剪刀1把、鑷子4把、注射器1ml 3個(gè)、5ml 2個(gè)、粗細(xì)絲線各1軸)。
(三)實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)組Ⅰ
1. 取家兔一只,稱體重后背位固定,1%普魯卡因局部麻醉,切開頸部皮膚,按常規(guī)手術(shù)操作,分離氣管、左側(cè)頸總動脈、右側(cè)頸總靜脈。插入氣管插管,由耳緣靜脈注入肝素溶液(1250U/kg)插入動脈導(dǎo)管連接血壓描記裝置。用動脈夾阻斷右頸總靜脈近心端,使之充盈,結(jié)扎遠(yuǎn)心端,靠近心端處剪口,插入導(dǎo)管以備輸液。
2. 輸液前觀察血壓、呼吸曲線,取血做血?dú)夥治、并聽診肺部呼吸音。然后通過靜脈輸入37℃~38℃生理鹽水,輸入量按100ml/kg,輸液速度為180~200滴/min。然后速度加快,幾乎呈柱狀,直至肺水腫形成。
3. 注意觀察呼吸、血壓的變化及氣管插管內(nèi)是否有粉紅色泡沫樣液體溢出, 并聽診肺部有無濕性啰音。當(dāng)肺水腫出現(xiàn)時(shí),用小吸管吸取少量氣管插管內(nèi)溢出之水腫液,備作水腫液蛋白質(zhì)定性實(shí)驗(yàn)。同時(shí)取血做血?dú)夥治。然后,處死動物,夾閉氣管,打開胸腔,觀察胸腔內(nèi)及心包腔內(nèi)積液,將心包腔內(nèi)積液擠至一端,用注射器抽取少量積液備用。然后將連接胸壁的組織離斷,同時(shí)在夾閉氣管的止血鉗上端剪斷氣管,(注意防止水腫液流出)提起心肺切斷腔靜脈及主動脈,去除胸腺及周圍組織,在肺動脈與肺靜脈的近肺端用細(xì)線結(jié)扎,剪斷血管(結(jié)扎線留在肺側(cè))以離斷心臟。用粗線在切斷氣管的分叉上1cm處進(jìn)行結(jié)扎,于結(jié)扎線上端切斷氣管。用濾紙吸去肺表面的液體,稱重,計(jì)算肺系數(shù)。肉眼觀察肺大體形態(tài)的改變。切開肺臟、注意有無泡沫樣液體流出。
對氣管插管中溢出的水腫液,腹腔積液進(jìn)行蛋白質(zhì)定性試驗(yàn),以了解微血管通透性的改變。
實(shí)驗(yàn)組Ⅱ
實(shí)驗(yàn)步驟與實(shí)驗(yàn)組Ⅰ不同之處是自頸總靜脈輸入生理鹽水(輸液量按100ml/kg,輸液速度為180~200滴/min )待輸入量完畢時(shí)將腎上腺素入壺(按腎上腺素0.45ml/kg)。其余步驟與實(shí)驗(yàn)組Ⅰ相同。
(四)注意事項(xiàng)
1. 輸液管道內(nèi)一定要將空氣排凈,避免氣體栓塞。
2. 輸液速度要保證180~200滴/min,以避免出現(xiàn)不典型肺水腫,同時(shí)也拖延實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
3. 測血?dú)鈺r(shí)注意血液與空氣隔絕,及時(shí)用膠塞封住針頭。
4. 解剖取肺時(shí),注意勿損傷肺表面并避免擠壓肺組織,以防水腫液流出,影響肺系數(shù)值。肺系數(shù)=肺質(zhì)量(克)/體質(zhì)量(㎏) 正常值4.1~5
5. 取心包液和腹水時(shí),不要刺破血管,尤其取腹水時(shí)要做正中切口,否則影響蛋白測定值。
附錄
水腫液蛋白質(zhì)定性-------磺基水楊酸法
原理:磺基水楊酸是一種生物堿試劑,在酸性環(huán)境時(shí)可與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合形成不溶于水的鹽類。
試劑:20%磺基水楊酸溶液
操作:取載玻片三張,于每張玻片兩端滴上需測的水腫液2~3滴。向玻片一端的水腫液中加入20%磺基水楊酸1滴,另一端加1滴生理鹽水,二者進(jìn)行比較,如水腫液變混濁即為陽性,清析透明為陰性。
(五)思考題
1. 大量快速輸入生理鹽水發(fā)生急性肺水腫的機(jī)制?
2. 臨床上對心衰患者在輸液時(shí)應(yīng)注意什么?
3. 急性肺水腫與缺氧、呼吸衰竭等章節(jié)的聯(lián)系及發(fā)生機(jī)制?
4. 水腫液蛋白測定的意義?
(丁春華)