原位雜交組織化學常用試劑及處理

　　二、關于探針的標記

　�。ㄒ�)cRNA探針的同位素標記

　　1．標記液（轉(zhuǎn)錄標記)

　　2．轉(zhuǎn)錄緩沖液

　　※：用地高辛或生物素標記時，用UTP替代。

　　3．標記終止液

　　4．標記探針水解液

　　先用dH₂O懸浮探針，再加入后兩種試劑，輕輕振搖混合，于60℃條件下反應。

　　5．探針水解時間

　　注：L_O－探針初始長度（kb)

　　L_f－探針的終長度（kb)

　　K－0.11kb/min

　　6．探針水解終止液

　　每次加入充分混合，臨用前配。

　　7．探針沉淀液

　　每次加入，充分混合，新鮮配制。

　�。ǘ�)寡聚核苷酸3’端標記（cRNA探針)

　　1．標記反應液

　　2．終止液：0.2mol/L EDTA

　　3.探針沉淀液

　�。ㄈ�)cRNA探針非同位素標記（地高辛及生物素)

　　1．標記液

　　△：生物素標記時為10mmol/L的生物素-11-UTP

　　※：為檢測標記率而加。

　　2．轉(zhuǎn)錄標記終止液

　�。�1)0.2mol/L EDTA：用于地高辛標記法

　�。�2)生物素標記終止液：

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