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  藥物分析西藥分析—熒光分析法           ★★★ 【字體:

藥物分析西藥分析—熒光分析法

來(lái)源:醫(yī)學(xué)全在線 更新:2007-5-16 考研論壇
某些物質(zhì)受紫外光或可見光照射激發(fā)后能發(fā)射出比激發(fā)光波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光。物質(zhì)的激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜,可以用作該物質(zhì)的定性分析。當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度、波長(zhǎng)、所用溶劑及溫度等條件固定時(shí),物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi),其發(fā)射光強(qiáng)度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比關(guān)系,可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高,濃度太大的溶液會(huì)有“自熄滅”作用,以及由于在液面附近溶液會(huì)吸收激發(fā)光,使發(fā)射光強(qiáng)度下降,導(dǎo)致發(fā)射光強(qiáng)度與濃度不成正比,故熒光分析法應(yīng)在低濃度溶液中進(jìn)行。
  所用的儀器為熒光計(jì)或熒光分光光度計(jì),按各藥品項(xiàng)下的規(guī)定,選定激發(fā)光波長(zhǎng)和發(fā)射光波長(zhǎng),并配制對(duì)照品溶液和供試品溶液。
  由于不易測(cè)定絕對(duì)熒光強(qiáng)度,故熒光分析法都是在一定條件下,用對(duì)照品溶液測(cè)得濃度的線性范圍后,再在每次測(cè)定前,用一定濃度的對(duì)照品溶液校定儀器的靈敏度;然后在相同的條件下,讀取對(duì)照品溶液及其試劑空白與供試品溶液及其試劑空白的讀數(shù),用下式計(jì)算供試品濃度:
      R<[i]>-R<[ib]>
  C<[i]>=──────×C<[r]>
      R<[r]>-R<[rb]>
  式中
  C<[i]>為供試品溶液的濃度;
  C<[r]>為對(duì)照品溶液的濃度;
  R<[i]>為供試品溶液的讀數(shù);
  R<[ib]>為供試品溶液試劑空白的讀數(shù);
  R<[r]>為對(duì)照品溶液的讀數(shù);
  R<[rb]>為對(duì)照品溶液試劑空白的讀數(shù)。
  因熒光分析法中的濃度與讀數(shù)的線性較窄,故(R<[i]>-R<[ib]>)/(R<[r]>-R<[rb]>)應(yīng)為0.50~2.0;如有超過(guò),應(yīng)在調(diào)節(jié)溶液濃度后再測(cè)。醫(yī)學(xué)全.在線quanxiangyun.cn
  對(duì)易被光分解的品種 ,可選擇一種激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng)與之近似而對(duì)光穩(wěn)定的物質(zhì)溶液,例如藍(lán)色熒光可用硫酸奎寧的稀硫酸溶液,黃綠色熒光可用熒光素鈉水溶液,紅色熒光可用羅丹明B水溶液等,先與對(duì)照品溶液比較測(cè)定其讀數(shù)關(guān)系,并在測(cè)定供試品溶液時(shí)用以代替對(duì)照品溶液,以校定儀器的靈敏度。
  熒光分析法因靈敏度高,故干擾因素也多。溶劑不純會(huì)帶入較大誤差,應(yīng)先作空白檢查,必要時(shí),應(yīng)用玻璃磨口蒸餾器蒸餾后再用。溶液中的懸浮物對(duì)光有散射作用,必要時(shí),應(yīng)用垂熔玻璃濾器濾過(guò)或用離心法除去。所用的玻璃儀器與測(cè)定池等也必須保持高度潔凈。溫度對(duì)熒光強(qiáng)度有較大的影響,測(cè)定時(shí)應(yīng)控制溫度一致。溶液中的溶氧有降低熒光作用,必要時(shí)可在測(cè)定前通入惰性氣體除氧。
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文章錄入:凌云    責(zé)任編輯:凌云 
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