(一)、用PCR等技術(shù)字標(biāo)本中擴(kuò)增真菌DNA.國內(nèi)應(yīng)用PCR與反向斑點(diǎn)雜交快速檢測及鑒定念珠菌主要種別。國外可以用PCR-DEIA技術(shù)從血清中擴(kuò)增出白色念珠菌的DNA來診斷念珠菌病。
針對(duì)真菌的共同序列而設(shè)計(jì)的‘全能引物’(pan-primer)而擴(kuò)增580bp的產(chǎn)物,為真菌所共有。檢測血液標(biāo)本即可明確體內(nèi)有無真菌感染。
(二)、用于真菌的型別分析醫(yī)學(xué).全在.線.提供.。國內(nèi)應(yīng)用隨機(jī)引物PCR擴(kuò)增后進(jìn)行真菌分型,結(jié)果可靠。應(yīng)用隨機(jī)引物擴(kuò)增物多態(tài)性分析(RAPD)可以將5種曲霉菌鑒別開(煙、黃、黑、土、構(gòu)巢曲霉)。國外結(jié)合PCR與酶標(biāo)記探針在紙條上進(jìn)行檢測(LiPA,lineprobeassay)可鑒別出主要的致病性真菌。
(三)、檢出念珠菌的基因變異快速確定念珠菌對(duì)酮康唑的耐藥性。此種耐藥性由基因的1554T突變?yōu)镃而致,應(yīng)用Lightcycler儀器,以熒光共振能量轉(zhuǎn)移和基因片段溶解溫度曲線技術(shù)測定。
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