1 試劑
1.1 鹽酸（1∶9)
10ml濃鹽酸加90ml蒸餾水。
1.2 0.2%鋁試劑溶液
0.2g鋁試劑加100ml蒸餾水溶解。
1.3 10%醋酸銨溶液
稱取10g醋酸銨（AR)，加蒸餾水溶解并稀釋至100ml。
1.4 準(zhǔn)鋁溶液（10μg鋁/ml)
精密稱取明礬[KAl（SO4)2·12H2O]（AR，無風(fēng)化)0.3518g，加1.5mol/l HCl8ml，加蒸餾水到500ml，為40μg鋁/ml的標(biāo)準(zhǔn)濃溶液。臨用時(shí)精確量取2.5ml標(biāo)準(zhǔn)鋁濃溶液于10ml容量瓶，用蒸餾水稀釋至刻度，為10μg鋁/ml標(biāo)準(zhǔn)液。
1.5 4mol /L NaOH溶液
稱取40g NaOH(A.R)，加蒸餾水溶解并稀釋至250ml。
1.60.5mol /L NaOH溶液
取50ml 4mol /L NaOH加蒸餾水至400ml。
1.70.1mol /L HCl溶液
1ml濃HCl（A.R)加蒸餾水至120ml。
取溴麝香草酚藍(lán)0.1g,加0.05mol/L NaOH3.2ml,溶解，再加水衡稀釋至200m。
2 操作
2.1樣品
精密量取1ml樣品于凱氏消化瓶內(nèi)，加1ml濃H2SO4于電爐上消化。從濃的白煙生成到白煙基本消除，再繼續(xù)消化15分鐘，稍冷，向消化瓶中quanxiangyun.cn/kuaiji/另入適量H2O2，于電爐上繼續(xù)消化至無氣泡生成，消化液呈無色透明。待冷后，用4mol/LNaOH中和消化液（10%白蛋白加5ml4mol/LNaOH)。然后將消化液轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，并用蒸餾水稀釋至刻度。
取2ml稀釋液于25ml帶塞比色管中（取2管)。另取2ml稀釋液于50ml三角燒瓶中，向三解燒瓶中加2滴BTB指示劑，如變藍(lán)，用0.1mol/LHCl滴定至黃綠色；如為黃色就用0.5mol/LNaOH滴定至黃綠色或淺藍(lán)色。用此方法將2ml樣品或?qū)φ障♂屢旱膒H值調(diào)至5.5~8.5，按此量將比色管內(nèi)的稀釋液pH值調(diào)至5.5~8.5。加1mlHCl(1∶9)，加蒸餾水使其總體積不超過17ml，加0.2%鋁試劑1ml、10%醋酸銨溶液5ml，加蒸餾水至25ml。加塞搖勻。放置20分鐘后，用530nm波長測其吸收度（OD值)。同時(shí)做空白對照，用1ml蒸餾quanxiangyun.cn/Article/水代替1ml樣品，其余操作同樣品。
2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線
精密量取標(biāo)準(zhǔn)鋁溶液（10μg鋁/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于25ml帶塞比色管中，鋁含量分別為0、2、4、6、8、10μg，從加1mlHCl（1∶9)起同樣品管。
3 計(jì)算
3.1 由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出，或從標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算出的直線回歸方程中求出對照管和樣品管的鋁含量（A)。
3.2 根據(jù)中和用去的堿量計(jì)算出2ml樣品和對照稀釋液中含4mol/LNaOH的ml數(shù)。
3.3 根據(jù)2ml對照稀釋液含的4mol/l NaOH量和含鋁量，計(jì)算出每ml4mol/l NaOH含鋁量。
3.4 根據(jù)每ml4mol/l NaOH含鋁量和2ml樣品稀釋液中含4mol/l NaOH的ml數(shù)，計(jì)算出2ml樣品稀釋液中，中和用的4mol/l NaOH含鋁量（B)。
3.5 計(jì)算樣品中含鋁量
樣品中含鋁量（μg/g蛋白)=[（A－B)÷2×10]÷蛋白含量（g/ml)
附注
1．鋁試劑不僅能與某些金屬離子形成有色的絡(luò)合物，同時(shí)也會(huì)由于溶液中H+濃度的改變而產(chǎn)生顏色的變化。因此測定時(shí)，要嚴(yán)格控制溶液的pH值在5.0左右，樣品和標(biāo)準(zhǔn)的pH值一致。
2．鋁試劑避光保存。
