血漿中的脂類(lèi)包括膽固醇、膽固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。
目前，對(duì)有關(guān)脂類(lèi)代謝疾患的診斷和治療過(guò)程，均必須檢測(cè)血漿（清)中的脂類(lèi)，通過(guò)其含量的變化，對(duì)臨床疾患提供協(xié)助診斷的依據(jù)。有關(guān)醫(yī)學(xué)科研工作，脂類(lèi)的定量檢測(cè)也是一項(xiàng)必備的研究項(xiàng)目。
1．膽固醇測(cè)定
血漿中膽固醇及其酯的含量檢測(cè)，從方法學(xué)上可分為兩大類(lèi)：一類(lèi)是化學(xué)法包括抽提法和直接測(cè)定法，這類(lèi)方法目前仍在沿用；另一類(lèi)是酶法測(cè)定，方法敏感特異快速，并能自動(dòng)化分析，已常規(guī)應(yīng)用�；瘜W(xué)測(cè)定法種類(lèi)多，由于顯色反應(yīng)的特異性不同，其結(jié)果有一定的差異。目前公認(rèn)的參考方法是Abell-Kendall(L-B反應(yīng))法www.med126.com。另外，三氯化鐵-硫酸反應(yīng)法（Zak法)具有顯色穩(wěn)定法、操作簡(jiǎn)便、靈敏度約5倍于L-B反應(yīng)法，膽固醇酯與游離膽固醇顯色程度比較接近等優(yōu)點(diǎn)，缺點(diǎn)是特異性差，干擾因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清樣品中的血紅蛋白，膽紅素以及硫酸的質(zhì)量等因素均可影響Zak方法的準(zhǔn)確性，Zak法更適合于科研使用。酶法測(cè)定血清膽固醇的方法已被廣泛采用，國(guó)產(chǎn)試劑已能滿足臨床的需要。膽固醇測(cè)定用的標(biāo)準(zhǔn)品，按美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局（NBS)出品純度達(dá)99.8%,是國(guó)際公認(rèn)的參考物，國(guó)內(nèi)李健齋等已純化制成符合這一要求的膽固醇純品，已供臨床檢測(cè)血清膽固醇使用。
2．甘油三酯測(cè)定
血漿甘油三酯的測(cè)定，目前多以化學(xué)法和酶法定量。化學(xué)法測(cè)定甘油三酯是以脂蛋白變性，水解成甘油，并以甘油為計(jì)算依據(jù)。酶法是以特異酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再測(cè)定甘油，方法特異，準(zhǔn)確而快速，臨床廣為應(yīng)用。目前甘油三酯測(cè)定的方法主要以定量甘油為依據(jù)，然而血清樣品中存在有游離甘油，如何從反應(yīng)過(guò)程中的總甘油中減去游離甘油，多年來(lái)一直在研究討論這一問(wèn)題。若不減去，其測(cè)定值將會(huì)高于血清樣品中的真值，如果要減去，就必須先測(cè)出血清樣品中的游離甘油，甘油三酯的測(cè)定方法將增加一個(gè)繁雜的步驟，實(shí)際工作中難以做到。有報(bào)道血清樣品中的游離甘油實(shí)際量是0.07～0.13mmol/L，相當(dāng)于甘油三酯的0.5～6.0mmol/L，為此建議，實(shí)測(cè)的甘油三酯量減去一個(gè)校正系數(shù)即：
甘油三酯（mmol/L)=[0.98×總甘油（mmol/L)]-0.07（mmol/L)。
這一校正系數(shù)也僅適用于健康人，對(duì)臨床病人并不一定適用。據(jù)報(bào)道，血清樣品的游離甘油一直是個(gè)未知數(shù)，無(wú)法測(cè)準(zhǔn)。為此，目前臨床測(cè)定血清甘油三酯時(shí)，基本上未考慮游離甘油，因?yàn)槠浜亢苌�，暫且忽略不記。甘油三酯測(cè)定的參考物，推薦三油酸甘油酯和三軟脂酸甘油酯混合物（2：1，W/W)，此參考物適用于化學(xué)法。在酶法測(cè)定中，仍以高純度的三油酸甘油酯為參考物。
3．磷脂測(cè)定
血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神經(jīng)磷脂、腦磷脂和其他少量磷脂。如需要分別檢測(cè)各種磷脂，可以通過(guò)薄層層析法、柱層析法和高壓液相色譜法。目前，臨床僅測(cè)定血清磷脂總量。血清磷脂總量的測(cè)定方法有化學(xué)方法和酶法兩大類(lèi)�；瘜W(xué)法是以磷脂中的磷為定量依據(jù)，因?yàn)槊苛字肿又卸己幸粋�(gè)磷酸根，故將磷脂的磷稱(chēng)為脂性磷。由于血清中磷脂大部分為卵磷脂，其分子量中磷約占4%，故將脂www.med126.com性磷換算成磷脂的系數(shù)，一般為25。由于化學(xué)法均需要抽提，再測(cè)抽提液中的磷脂的磷，血清中的磷酸鹽不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸鹽對(duì)磷脂測(cè)定的干擾很少。酶法是利用磷脂酶進(jìn)行定量測(cè)定。生物體中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四種。磷脂酶D特異性差，均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神經(jīng)磷脂，三者約占血清總磷脂的95%，臨床多用含磷脂酶d 的試劑進(jìn)行磷脂的定量測(cè)定。
4．游離脂肪酸測(cè)定
游離脂肪酸屬于未酯化的一類(lèi)脂肪酸，故又稱(chēng)為非酯化脂肪酸，其量很少，采用方法必須是靈敏的方法，還需要避免脂肪水解產(chǎn)生脂肪酸的干擾。測(cè)定方法有：①滴定法需要微量滴定裝置，因?yàn)橐ㄟ^(guò)肉眼觀察顏色，難免會(huì)有主觀因素的影響，所以難以測(cè)定準(zhǔn)確，很難用于常規(guī)；②光度法，以銅皂法常用；③酶法，主要采用特異性不強(qiáng)的脂肪酶D進(jìn)行檢測(cè)，方法特異，快速準(zhǔn)確，已常規(guī)應(yīng)用于臨床。
