水禽衣原體病的確診方法有哪些?
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(1)病料采集采集剛死亡禽新鮮的肝、脾、心肌以及胸腔、腹腔和
心包腔中的分泌物等病料。(2)染色鏡檢將肝、脾、心肌等做觸片,或將胸腹腔等分泌物做涂片,用姬姆薩染色鏡檢,衣原體呈紫色。(3)病原分離將上述病料磨細用滅菌生理鹽水做1:5—1:10稀釋懸液,適量加入抗生素如
鏈霉素,或卡那霉素,或
萬古霉素,每毫升1000~2 000單位,但不能加
青霉素。置4℃冰箱過夜,經l000轉/分,離心10~15分鐘,取中間清液作為病原分離材料。①雞胚接種接種用的雞胚要求來源于不飼喂抗生素,尤其是
四環(huán)素類、青霉素以及無
衣原體感染雞群。胚齡為6~8日齡,卵黃囊接種,每枚0.1~0.2毫升。置37~38℃繼續(xù)孵育8~10天。72小時內死亡弁去,對以后死亡雞胚逐個取卵黃囊膜壓片染色檢查有無衣原體。陽性的卵黃囊膜經細菌檢查陰性者作雞胚傳代或供其他試驗用。如第一代未發(fā)現衣原體,應再
盲傳2~3代檢查。雞胚多于接種后5~6天死亡,卵黃膜充血,絨尿膜
水腫。②小白鼠接種15克左右小白鼠腹腔接種。腹腔內
腹水大增,并集聚大量纖維蛋閂性滲出物,使腹部膨大,不能行走而死亡。脾臟腫大,是檢驗、保存、傳代農原體的首選器官。也可用腦內和鼻內接種。此外,也可用豚鼠接種。③細胞接種 許多細胞株如Vero、BHK21、Hela229、BGM、MoCoy等以及雞胚繼代細胞內復制。本病原體能在雞胚細胞產生蝕斑。在接種后3天,有60%-70%細胞受感染,即可用染色檢查到衣原體。④血清學檢查用補體結合試驗方法檢查發(fā)病初期和康復期抗體滴度,當抗體滴度增加4倍,即可判陽性。此外,也可用酶聯(lián)免疫吸附試驗、瓊脂雙擴交叉試驗、間接血凝試驗等方法。
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實驗室檢測診斷
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實驗室檢測
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