狂犬病的實驗室診斷有哪些?
感謝大夫為我快速解答——該如何治療和防治
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1?直接染色法剖檢病犬取大
小腦、延腦等,最好取
海馬回,各切取lcm3小塊,置滅菌容器,在冷藏條件下運送至實驗室。若檢查內基氏小體,可切取海馬回,置吸水紙上,切面向上,載玻片輕壓切面,制成壓印標本,室溫自然干燥后染色鏡檢,檢查有無特異包涵體。內基氏小體位于神經細胞胞漿內,直徑3?20fxm不等,呈橢圓形,呈嗜酸性著染(鮮紅色),檢出內基氏體,即可診斷為狂犬病。犬腦的陽性檢出率為70%左右,在檢查犬腦時還應注意與犬瘟熱病毒引起的包涵體相區(qū)別。熒光抗體法也是一種特異而快速的直接染色檢查診斷法。將本病高免血清用熒光色素標記,制成熒光抗體。取可疑病例腦組織或唾液腺制成壓印片或冰凍切片,用熒光抗體染色,在熒光顯微鏡下觀察,胞漿內出現亮綠色熒光顆粒者為陽性。該方法用于動物腦組織陽性檢出率很高,可達95%,是狂犬病的一種較好的診斷方法。2.病毒分離取患病動物的腦或唾液腺等材料并用緩沖鹽水或含10%滅活豚鼠血清的生理鹽水研磨成乳劑,腦內接種5?7日齡乳鼠,每只注射0.03mL。接種后繼續(xù)由母鼠同窩哺養(yǎng),3?4天后如發(fā)現母鼠哺乳力減弱、痙攣、麻痹死亡,即可取其腦組織檢查包涵體,并制成抗原,做病毒鑒定。如經7天仍不發(fā)病,可殺死其中2只,剖取鼠腦做成懸液,如上傳代。如第二代仍不發(fā)病,可再傳代。連續(xù)
盲傳三代,觀察4周而仍不發(fā)病者可判作陰性。也可應用3周齡以內的幼鼠,如上做腦內接種,每只0.03mL。如有條件,可同時接種倉
鼠腎原代細胞或倉鼠腎繼代細胞和BHK-21細胞等。新分離的病毒可用電子顯微鏡直接觀察,或者應用抗狂犬病特異免疫血清進行中和試驗或血凝抑制試驗加以鑒定。3.血清學檢驗常用的血清學方法主要有中和試驗、補體結合試驗、間接熒光抗體試驗、交叉保護試驗、血凝抑制試驗以及間接免疫酶試驗等。一般實驗室常用的血清學診斷法為中和試驗。近年來已將單克隆抗體技術用于狂犬病的診斷,特別適用于區(qū)別狂犬病病毒與該病毒屬的其他相關病毒。此外,還有斑點免疫測定、核酸雜交技術、PCR技術、對流免疫電泳、Western印跡等新型診斷方法。
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