雞的病毒性關(guān)節(jié)炎
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雞病毒性關(guān)節(jié)炎(Viral Arthritis)是一種由呼腸孤病毒引起的雞的重要傳染病。病毒主要侵害關(guān)節(jié)滑膜、腱鞘和心肌，引起足部關(guān)節(jié)腫脹，腱鞘發(fā)炎，繼而使腓腸腱斷裂。病雞關(guān)節(jié)腫脹、發(fā)炎，行動(dòng)不便，跛行或不愿走動(dòng)，采食困難，生長(zhǎng)停滯。雞病毒性關(guān)節(jié)炎概述 雞群的飼料利用率下降，淘汰率增高，在經(jīng)濟(jì)上造成一定的損失。1957年Olson對(duì)該病作了首次報(bào)道。其后美國(guó)、英國(guó)、意大利、荷蘭、日本、匈牙利等國(guó)相繼報(bào)道了病毒性關(guān)節(jié)炎的病例。從80年代中期開始，我國(guó)先后在四川、河北、北京、黑龍江、上海、廣東、吉林、云南、貴州、河南、山東、湖北等地發(fā)現(xiàn)本病，并從有些病例中分離到呼腸孤病毒。雞病毒性關(guān)節(jié)炎是我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)不可忽視的傳染病之一。病原體 病毒性關(guān)節(jié)炎的病原為禽呼腸孤病毒(Avain reovirus)。該病毒與其他動(dòng)物的呼腸孤病毒在形態(tài)方面基本相同，病毒粒子無(wú)囊膜，呈20面體對(duì)稱排列，直徑約為75nm，在氯化銫中的浮密度為1.36～1.37g/ml。其基因組由10個(gè)節(jié)段的雙鏈RNA構(gòu)成�！ ∏莺裟c孤病毒對(duì)熱有一定的抵抗能力，能耐受60℃達(dá)8～10h。對(duì)乙醚不敏感。對(duì) H202、pH3、2%來(lái)蘇爾、3%福爾馬林等均有抵抗力。用70%
乙醇和0.5%有機(jī)碘可以滅活病毒�！ 『裟c孤病毒可通過(guò)卵黃囊和絨毛尿囊膜(CAM)接種而在雞胚中生長(zhǎng)繁殖。通過(guò)卵黃囊接種，一般在接種后3～5天雞胚死亡；通過(guò)CAM接種，通常在接種后7～8天雞胚死亡。除雞胚之外，Reov還可在原代雞胚成纖維細(xì)胞、肝、睪丸細(xì)胞，以及vero、BHK-21等傳代細(xì)胞中生長(zhǎng)�！ ∮捎谌狈�(duì)多種動(dòng)物紅細(xì)胞的凝集特性而使禽Reov區(qū)別于其他動(dòng)物的呼腸孤病毒。 Reov各毒株之間具有共同的沉淀抗原，但中和抗原具有明顯的異源性。由于采用的試驗(yàn)方法不同，對(duì)毒株的分型結(jié)果也不盡相同。Rosenberger等認(rèn)為呼腸孤病毒經(jīng)常以抗原亞型，而不是以獨(dú)特的血清型存在。我國(guó)從1985年首次報(bào)道雞病毒性關(guān)節(jié)炎以來(lái)，已經(jīng)在全國(guó)各地分離了多個(gè)Reov毒株，但不同毒株之間的相互關(guān)系還沒有進(jìn)行過(guò)系統(tǒng)研究�！ ‰u呼腸孤病毒除引起雞關(guān)節(jié)炎以外，還能引起一些其他的疾病和病變，如
吸收不良綜合征、傳染性腺胃炎、
心包炎、心包積水、
心肌炎、腸炎、肝炎、法氏囊及胸腺萎縮、骨骼異常,以及某些呼吸道癥狀。
流行病學(xué) 雞呼腸孤病毒廣泛存在于自然界，可從許多種鳥類體內(nèi)分離到。但是雞和火雞是目前已知唯一可被Reov引起關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物。病毒在雞中的傳播有兩種方式：水平傳播和垂直傳播。雖然有資料表明，Reov可通過(guò)種蛋垂直傳播，但水平傳播是該病的主要傳染途徑。病毒感染雞之后，首先在呼吸道和消化道復(fù)制后進(jìn)入血液，24～48h后出現(xiàn)病
毒血癥，隨后即向體內(nèi)各組織器官擴(kuò)散，但以關(guān)節(jié)腱鞘及消化道的含毒較高。排毒途徑主要是經(jīng)過(guò)消化道。試驗(yàn)表明，由口腔感染SPF成年雞，4天后可從呼吸道、消化道、生殖道和股關(guān)節(jié)分離到病毒，14～15天后含毒量明顯降低。感染后的Reov在股關(guān)節(jié)內(nèi)存在3周，14～16周后，仍能從感染雞的泄殖腔發(fā)現(xiàn)病毒。因此，帶毒雞是重要的傳染源�！ ‰u病毒性關(guān)節(jié)炎的感染率和發(fā)病率因雞的年齡不同而有差異。雞年齡越大，敏感性越低，10周齡之后明顯降低。一般認(rèn)為，雛雞的易感性可能與雛雞的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全有關(guān)。 自然感染發(fā)病多見于4～7周齡雞，也有更大雞齡發(fā)生關(guān)節(jié)炎的報(bào)道。發(fā)病率可高達(dá)100%，而死亡率通常低于6%。在山東部分地區(qū)進(jìn)行的一次血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，在11萬(wàn)羽肉仔雞中，呼腸孤病毒感染的陽(yáng)性率達(dá)75.2%，5萬(wàn)羽蛋雞中陽(yáng)性率為23.5%。臨床癥狀 本病大多數(shù)野外病例均呈隱性感染或
慢性感染，要通過(guò)血清學(xué)檢測(cè)和病毒分離才能確定。在急性感染的情況下，雞表現(xiàn)跛行，部分雞生長(zhǎng)受阻；慢性感染期的跛行更加明顯，少數(shù)病雞跗關(guān)節(jié)不能運(yùn)動(dòng)。病雞食欲和活力減退，不愿走動(dòng)，喜坐在關(guān)節(jié)上，驅(qū)趕時(shí)或勉強(qiáng)移動(dòng)，但步態(tài)不穩(wěn)，繼而出現(xiàn)跛行或單腳跳躍�！ 〔‰u因得不到足夠的水分和飼料而日漸消瘦，貧血，發(fā)育遲滯，少數(shù)逐漸衰竭而死。檢查病雞可見單側(cè)或雙側(cè)躡部、跗關(guān)節(jié)腫脹。在日齡較大的肉雞中可見腓腸腱斷裂導(dǎo)致頑固性跛行�！ 》N雞群或蛋雞群受感染后，產(chǎn)蛋量可下降10%～15%。也有報(bào)道種雞群感染后種蛋受精率下降，這可能是病雞因運(yùn)動(dòng)功能障礙而影響正常的交配所致。病理變化 1．剖檢變化 患雞跗關(guān)節(jié)上下周圍腫脹，切開皮膚可見到關(guān)節(jié)上部腓腸腱
水腫，滑膜內(nèi)經(jīng)常有充血或點(diǎn)狀出血，關(guān)節(jié)腔內(nèi)含有淡黃色或血樣滲出物，少數(shù)病例的滲出物為膿性，與傳染性滑膜炎病變相似，這可能與某些細(xì)菌的繼發(fā)感染有關(guān)。其他關(guān)節(jié)腔呈淡紅色，關(guān)節(jié)液增加。根據(jù)病程的長(zhǎng)短，有時(shí)可見周圍組織與骨膜脫離。大雛或成雞易發(fā)生腓腸腱斷裂。換羽時(shí)發(fā)生關(guān)節(jié)炎，可在患雞皮膚外見到皮下組織呈紫紅色。慢性病例的關(guān)節(jié)腔內(nèi)滲出物較少，腱鞘硬化和粘連，在跗關(guān)節(jié)遠(yuǎn)端關(guān)節(jié)軟骨上出現(xiàn)凹陷的點(diǎn)狀潰爛，然后變大、融合，延伸到下方的骨質(zhì)，關(guān)節(jié)表面纖維軟骨膜過(guò)度增生。有的在切面可見到肌和腱交接部發(fā)生的不全斷裂和周圍組織粘連，關(guān)節(jié)腔有膿樣、干
酪樣滲出物。有時(shí)還可見到心外膜炎，肝、脾和心肌上有細(xì)小的壞死灶�！ �2．組織學(xué)病變 一般來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)室感染和自然感染的病變是一致的。在急性期出現(xiàn)水腫、凝固性壞死，異嗜細(xì)胞集聚血管周圍浸潤(rùn)，網(wǎng)狀細(xì)胞增生，最后引起腱鞘壁層明顯增厚，滑膜腔充滿異嗜細(xì)胞和脫落的滑膜細(xì)胞，隨著破骨細(xì)胞增生而形成骨膜炎。在慢性期，滑膜形成絨毛樣突起，并有淋巴樣結(jié)節(jié)，炎癥出現(xiàn)一段時(shí)間之后，大量纖維組織增生，明顯見到網(wǎng)狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和漿細(xì)胞的浸潤(rùn)或增生。趾關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)區(qū)也出現(xiàn)相同的一般炎癥反應(yīng)。心肌纖維之間的異噬細(xì)胞浸潤(rùn)是此病較為恒定的變化。有些病例伴有單核細(xì)胞或網(wǎng)狀細(xì)胞的增生。肝臟的病變有時(shí)也較為明顯，主要表現(xiàn)為大小不一的出血灶和肝細(xì)胞壞死灶，在壞死灶的周圍有異染性細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)。紅細(xì)胞、血細(xì)胞容積和白細(xì)胞總數(shù)一般在正常范圍內(nèi)，異嗜細(xì)胞百分比稍有增加，但淋巴細(xì)胞百分比下降。診斷鑒別 1.根據(jù)癥狀和病變進(jìn)行初步診斷 雖然此病的類癥鑒別頗為困難，但根據(jù)癥狀和病變的特點(diǎn)，在臨診中可對(duì)該病做出初步診斷。以下幾點(diǎn)具有診斷價(jià)值： (1)病雞跛行，跗關(guān)節(jié)腫脹。 (2)心肌纖維之間有異噬細(xì)胞浸潤(rùn)�！ �(3)患病毒性關(guān)節(jié)炎的雞群中，常見有部分雞呈現(xiàn)發(fā)育不良綜合征現(xiàn)象，病雞蒼白，骨鎢化不全，羽毛生長(zhǎng)異常，生長(zhǎng)遲緩或生長(zhǎng)停止。 2．病原學(xué)診斷 (1)病毒的分離與鑒定：病原的分離鑒定是最確切的診斷方法�？蓮哪[脹的腱鞘、跗關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)液、氣管和支氣管、腸內(nèi)容物及脾臟等取病料進(jìn)行病毒分離。從病變部分分離病毒時(shí)，要注意取病料的時(shí)間，感染后2周之內(nèi)較易分離到病毒。病料在接種前的處理可參考其他病毒分離時(shí)的操作程序。從野外病料分離病毒，最好采用5～7日齡的雞胚卵黃囊內(nèi)接種，雞胚應(yīng)來(lái)自SPF或沒有Reo感染的種雞群。接種后3～5天，雞胚死亡，胚體出血，內(nèi)臟器官充血、出血、胚體呈淡紫色。如種蛋帶有Reo母源抗體，或者病料含毒量低，則雞胚死亡的時(shí)間會(huì)推遲，也可能有部分雞胚會(huì)孵出。在接種后較長(zhǎng)時(shí)間才死亡的雞胚，其胚體發(fā)育不良，肝、脾、心腫大并有細(xì)小壞死灶，胚體呈暗紫色。如將含病毒材料接種于CAM上，接種后的胚胎死亡規(guī)律和胚體變化與卵黃囊接種的結(jié)果基本相同，特征變化是絨毛尿囊膜增厚，有白色或淡黃色的痘斑樣病變，CAM細(xì)胞內(nèi)可見到胞漿內(nèi)包含體�！ 》蛛x到病毒之后，可通過(guò)病毒理化特性測(cè)定、電鏡觀察、病毒核酸電泳、血清學(xué)檢驗(yàn)皮動(dòng)物敏感性試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定�！ �(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：應(yīng)用ELISA雙抗體夾心法可以檢測(cè)雞Reo病毒。該法具有較高的特異性和敏感性，在人工感染后2～27天，關(guān)節(jié)滑膜、腱鞘和脾臟中病毒檢出翠為100%�！ �(3)熒光抗體法(FA) FA是檢測(cè)雞Reo病毒的一個(gè)比較有效、快速、特異的方法。將病雞的腱鞘、肝、脾等進(jìn)行冰凍切片、丙酮固定后，用抗Reo病毒的熒光抗體染色，熒光顯微鏡下可見到亮綠色的團(tuán)塊狀抗原，據(jù)此可對(duì)本病進(jìn)行診斷。肖成蕊等采用 FA檢測(cè)8例人工感染雞及18例自然感染雞，脾臟和肝臟檢出率為100%，認(rèn)為脾和肝是 FA檢測(cè)Reo病毒的首選器官。 3．血清學(xué)診斷 血清學(xué)檢驗(yàn)的方法很多，除了常用的瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)外，還有間接熒光抗體方法(IFA)及中和試驗(yàn)(VN)等�！ �(1)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)： AGP是最常用的雞病毒性關(guān)節(jié)炎的診斷方法。病毒感染2～3周后，該方法能檢查出呼腸孤病毒的群特異性抗體。王錫望等采用S1133株接種雞胚尿囊膜，制備雞呼腸孤病毒AGP抗原。用該抗原對(duì)腳掌部接種的
雞血清進(jìn)行AGP檢測(cè)，接種后7天的陽(yáng)性率為93%，14～90天為100%，105天為94%，120天為64%，150天為25%。該法雖然敏感性稍低，不適宜檢測(cè)低滴度抗體，但操作簡(jiǎn)便，易于推廣，實(shí)用性強(qiáng)，既可用于雞群流行病學(xué)調(diào)查，又可用于雞病毒性關(guān)節(jié)炎的診斷�！ �(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)： Slaght等首次建立了ELISA方法檢測(cè)禽Reo病毒抗體，使用S1133毒株作抗原，發(fā)現(xiàn)它與Reo25和WVV2939株的抗體發(fā)生反應(yīng)，同源抗體滴度最高。國(guó)內(nèi)陳士友等、單松華等先后建立了檢測(cè)禽Reo抗體的ELISA方法。該法與AGP相比，具有敏感性高、快速、適合自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。目前，ELISA系統(tǒng)已商品化。該系統(tǒng)適合于群體Reo抗體水平的分析。防制措施 對(duì)該病目前尚無(wú)有效的治療方法，所以預(yù)防是控制本病的唯一方法。由于Reo病毒本身的特點(diǎn)，加上現(xiàn)代養(yǎng)雞的高密度，要防止雞群接觸病毒是困難的，因此，預(yù)防接種是目前條件下防止雞病毒性關(guān)節(jié)炎的最有效方法。為了防止本病流行，在國(guó)外研制出了許多種弱毒苗和滅能的禽呼腸孤病毒疫苗，并制定了相應(yīng)的免疫程序。目前國(guó)外應(yīng)用的弱毒疫苗有通過(guò)雞胚72代致弱的S-1133弱毒株，可飲水免疫30周齡或10~17周齡種雞，其后代能抵抗經(jīng)口攻毒；完全減毒疫苗P100苗，此苗是用S-1133毒株通過(guò)雞胚傳235代后，再通過(guò)雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)100代致弱而成。P-100苗可用于1日齡雛雞，皮下接種，經(jīng)14日后免疫雛雞能抵抗同源病毒的攻擊。還有UMI-203弱毒苗，蓋淼對(duì)8~18周齡的種雞無(wú)致病力，但對(duì)雛雞的毒力很強(qiáng)。該苗的優(yōu)點(diǎn)是交叉免疫比S-1133株強(qiáng)，因其抗原性較寬�！ ∮捎陔r雞對(duì)致病性Reo病毒最易感，而至少要到2周齡開始才具有對(duì)Reo病毒的抵抗力，因此，對(duì)雛雞提供免疫保護(hù)應(yīng)是防疫的重點(diǎn)。接種弱的活疫苗可以有效地產(chǎn)生主動(dòng)免疫，一般采用皮下接種途徑。但用S-1133弱毒苗與馬立克氏病疫苗同時(shí)免疫時(shí)，S1133會(huì)干擾馬立克氏病疫苗的免疫效果，故兩種疫苗接種時(shí)間應(yīng)相隔5天以上。無(wú)母源抗體的后備雞，可在6-8日齡用活苗首免，8周齡時(shí)再用活苗加強(qiáng)免疫，在開產(chǎn)前2～3周注射滅活苗，一般可使雛雞在3周內(nèi)不受感染。這已被證明是一種有效的控制雞病毒性關(guān)節(jié)炎的方法。將活疫苗與滅活疫苗結(jié)合免疫種雞群，可以達(dá)到很好的免疫效果。但在使用活疫苗時(shí)要注意疫苗毒株對(duì)不同年齡的雛雞的毒性是不同的。 一般的預(yù)防方法是加強(qiáng)衛(wèi)生管理及雞舍的定期消毒。采用“全進(jìn)全出”的飼養(yǎng)方式，對(duì)雞舍徹底清洗和消毒，可以防止由上批感染雞留下的病毒的感染。由于患病雞長(zhǎng)時(shí)間不斷向外排毒，是重要的感染源，因此，對(duì)患病雞要堅(jiān)決淘汰。
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