| 公開(公告)號 | CN101153278A |
| 公開(公告)日 | 2008.04.02 |
| 申請(專利)號 | CN200610116765.7 |
| 申請日期 | 2006.09.29 |
| 專利名稱 | 重組人粒細胞集落刺激因子的生產(chǎn)方法 |
| 主分類號 | C12N15/09(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/09(2006.01)I;C12N15/27(2006.01)I;C07K14/53(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海新生源醫(yī)藥研究有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 黃陽濱;孫九如;張 翊;任 軍;張繼崗;梁光軍 |
| 地址 | 201203上海市徐匯區(qū)田林路398號4樓A座 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種重組人粒細胞集落刺激因子(rhG-CSF)的生產(chǎn)方法，其特征在于，它包含以下步驟： a.獲得優(yōu)化的重組人巨噬細胞集落刺激因子的DNA序列； b.構(gòu)建合適表達載體； c.轉(zhuǎn)化宿主細胞，篩選獲得高表達的工程細胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種重組人粒細胞集落刺激因子(rhG-CSF)的編碼序列、生產(chǎn)該重組人粒細胞集落刺激因子的方法，以及用于該方法的表達載體和宿主細胞。采用了pET30a(+)表達rhG-CSF，獲得了高水平的表達菌株；通過控制發(fā)酵條件，達到了較高蛋白表達率；進一步表達形式分析發(fā)現(xiàn)其為包涵體表達。在此基礎(chǔ)上對分泌表達的重組人粒細胞集落刺激因子的純化進行了大量的摸索和研究后，得到了一套重組人粒細胞集落刺激因子純化方法。用本法，可得到高得率、高純度的重組人粒細胞集落刺激因子蛋白，并能滿足臨床需要。本發(fā)明可高效、簡便、低成本地獲得重組人粒細胞集落刺激因子純品。 |
| 國際公布 |
