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以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細(xì)胞及祖細(xì)胞的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN101096654A  
公開(kāi)(公告)日 2008.01.02  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200710041123.X  
申請(qǐng)日期 2007.05.24  
專(zhuān)利名稱(chēng) 以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細(xì)胞及祖細(xì)胞的方法  
主分類(lèi)號(hào) C12N5/08(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C12N5/08(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)N  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 上海交通大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 韓 偉;吳明媛;林小娟;俊芬  
地址 200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 上海交達(dá)專(zhuān)利事務(wù)所  
代理人 王錫麟;王桂忠  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細(xì)胞及祖細(xì)胞的方法,其特征在于,具體步驟包括: (1)從髓、外周血或臍帶血中取樣,用密度梯度離心分離出單核細(xì)胞,然后用CD34分離試劑盒對(duì)CD34細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,采用免疫磁珠技術(shù)對(duì)CD34細(xì)胞進(jìn)行純化,得到CD34+細(xì)胞; (2)采用含10%-20%胎牛或人血清的細(xì)胞培養(yǎng)基對(duì)上述CD34+細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),加入細(xì)胞因子,加入蛋白,培養(yǎng)1周,換入細(xì)胞培養(yǎng)基,并重新加入蛋白再繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增1周,得到增殖了的造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞。  
摘要 本發(fā)明是一種生物工程技術(shù)領(lǐng)域的以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細(xì)胞及祖細(xì)胞的方法。步驟包括:(1)從骨髓、外周血或臍帶血中,用密度梯度離心法分離制備單個(gè)核細(xì)胞,然后對(duì)CD34細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,而后對(duì)其進(jìn)行純化,得到CD34+細(xì)胞;(2)將CD34+細(xì)胞加入細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),同時(shí)加入細(xì)胞因子和GST-hDSL重組蛋白,培養(yǎng)后,換入新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)基并重新加入細(xì)胞因子和GST-hDSL重組蛋白再繼續(xù)培養(yǎng),得到增殖了的造血干、祖細(xì)胞。從CD34+細(xì)胞和從總集落數(shù)及高增殖潛能集落數(shù)來(lái)檢測(cè),本發(fā)明可有效促進(jìn)人造血干、祖細(xì)胞的增殖,并將在生物醫(yī)藥領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。  
國(guó)際公布  
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