| 公開(公告)號 | CN101073666A |
| 公開(公告)日 | 2007.11.21 |
| 申請(專利)號 | CN200710098289.5 |
| 申請日期 | 2007.05.11 |
| 專利名稱 | 一種制備高純度胰激肽原酶原料藥的方法 |
| 主分類號 | A61K38/48(2006.01)I |
| 分類號 | A61K38/48(2006.01)I;A61K9/19(2006.01)I;C12N9/64(2006.01)I;A61P3/06(2006.01)I;A61P3/10(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I;A61P9/10(2006.01)I;A61P9/12(2006.01)I;A61P25/02(2006.01)I;A61P27/02(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海麗珠制藥有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 萬龍巖;陳一平;楊志建 |
| 地址 | 201206上海市浦東金橋出口加工區(qū)桂橋路1150號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京泛華偉業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 郭廣迅 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種制備高純度胰激肽原酶原料藥的方法，其特征在于包括以下步驟： 1.配制：配制0.15-0.5mol/L的NH4AC緩沖液和0.1-0.5mol/L的NH4AC緩沖液，調(diào)整至pH6.0，并測電導(dǎo)值； 2.層析： 2.1平衡：將裝有QAE-SepharoseFastFlow離子柱填料的層析柱，用pH6.0的0.15-0.5mol/L的NH4AC緩沖液平衡，直至進(jìn)出溶液pH值一致、電導(dǎo)值相同后平衡完畢； 2.2進(jìn)樣：調(diào)胰激肽原酶中間體的pH值與平衡液相近(6.1～6.2)，電導(dǎo)值略低于平衡液電導(dǎo)值(略低0.2～0.3×104μs/cm)，根據(jù)每升填料最大交換量2000萬單位計算上樣量并將上樣液上柱； 2.3洗滌：用pH6.0的0.15-0.5mol/L的NH4AC緩沖液沖洗柱子，同時用分光光度計跟蹤檢測流出液在280nm處的吸收值，沖洗至洗出液OD值低于0.5時停止； 2.4洗脫：用pH6.0的0.1-0.5mol/L的NH4AC緩沖液以500～600ml/min流速洗脫柱子，同時用分光光度計進(jìn)行跟蹤檢測其在253nm處的吸收值，收集峰液； 3.超濾脫鹽：將收集液加純化水超濾脫鹽濃縮，當(dāng)超出液電導(dǎo)值小于0.1×104μs/cm以下時，即可停止加純化水，繼續(xù)濃縮； 4.濃縮液過濾； 5.加輔料凍干； 6.過篩、分裝。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種制備高純度生物原料藥的方法，特別是一種高純度胰激肽原酶原料藥的方法。該方法由胰激肽原酶中間體在優(yōu)化的分離條件下，經(jīng)過QAE-Sepharose Fast Flow離子柱層析純化制得的激肽原酶的原料藥。該原料藥的純度高達(dá)75％以上，效價增加55單位/mg以上，比活達(dá)到350單位/mg蛋白以上。 |
| 國際公布 |
