| 公開(公告)號 | CN100345971C |
| 公開(公告)日 | 2007.10.31 |
| 申請(專利)號 | CN03141577.6 |
| 申請日期 | 2003.07.14 |
| 專利名稱 | 重組人干細(xì)胞因子的原核表達(dá)載體、工程菌及制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/70(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/715(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 第二軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 陳國友;蔣應(yīng)明;黃 欣;張 意;盧 琳;施群英;曹雪濤 |
| 地址 | 200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 徐 迅 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種用于重組表達(dá)人干細(xì)胞因子的原核表達(dá)載體，其特征在于，所述的載體含有人干細(xì)胞因子表達(dá)盒以及與所述表達(dá)盒操作性相連的啟動子，所述的表達(dá)盒從5’至3’依次具有：序列為TTAACTTTA的增強(qiáng)子、長度為14±2bp的上游間隔序列、和人干細(xì)胞因子的編碼序列、終止密碼子； 其中所述的上游間隔序列具有SEQIDNO：7中第10-23位的序列。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及高效表達(dá)重組人干細(xì)胞因子(rhSCF)的表達(dá)載體、工程菌及制備方法。本發(fā)明還提供了通過優(yōu)選的培養(yǎng)基成分及優(yōu)化發(fā)酵參數(shù)，建立了工程菌高密度發(fā)酵方法。還提供了通過包涵體變性、蛋白復(fù)性、色譜分離制備高純度重組人干細(xì)胞因子的方法。本發(fā)明中構(gòu)建的重組人干細(xì)胞因子表達(dá)工程菌具有表達(dá)量高，表達(dá)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，所采取的純化工藝穩(wěn)定可靠，得率高，利于大規(guī)模生產(chǎn)。 |
| 國際公布 |
