公開(公告)號(hào)
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CN1328380C
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公開(公告)日
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2007.07.25
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN01141415.4
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申請(qǐng)日期
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2001.09.24
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專利名稱
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高效表達(dá)水蛭素及其生產(chǎn)方法
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主分類號(hào)
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C12N15/15(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/15(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C07K14/815(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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天津天士力制藥股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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趙 凱;吳祖澤;苑 賓;張津輝;李滿文;熊志紅;蔣中華;董春娜;曹菊榮;于愛平
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地址
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300402天津市北辰科技園遼河?xùn)|路1號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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天津;12
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主權(quán)項(xiàng)
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一種新型編碼水蛭素的DNA分子,其特征在于該DNA分子與來源于水蛭的天然的水蛭素2型DNA分子相比,該DNA分子的第121位核苷酸由胞苷酸變異為鳥苷酸、第156位核苷酸由胸苷酸變異為胞苷酸,第157位核苷酸由腺苷酸變異為鳥苷酸;其前導(dǎo)序列為CTCGAGAAAAGA。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種生物工程的抗栓藥物及其生產(chǎn)方法,具體而言是涉及一種新型水蛭素及其生產(chǎn)方法。采用全人工合成的方法獲得變異的HV2全基因,在其5’端上游加入一段合適前導(dǎo)序列。構(gòu)建畢赤酵母分泌型表達(dá)載體pHV2,載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞GS115,并整合入宿主細(xì)胞的染色體中。篩選高效表達(dá)菌株,經(jīng)優(yōu)化發(fā)酵誘導(dǎo)、分離純化步驟,提高了重組基因產(chǎn)物的生產(chǎn)效率,產(chǎn)物表達(dá)水平和生物學(xué)活性,以及對(duì)抗凝、抗栓的藥效學(xué)研究表明,高于文獻(xiàn)報(bào)道,這為水蛭素II型的大規(guī)模生產(chǎn)和臨床應(yīng)用的深入研究提供了物質(zhì)來源。
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國際公布
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