| 公開(公告)號 | CN101152240A |
| 公開(公告)日 | 2008.04.02 |
| 申請(專利)號 | CN200710056178.8 |
| 申請日期 | 2007.10.16 |
| 專利名稱 | 一種中藥膜莢黃芪的質(zhì)量檢測方法 |
| 主分類號 | A61K36/481(2006.01)I |
| 分類號 | A61K36/481(2006.01)I;G01N21/33(2006.01)I;G01N30/72(2006.01)I;A61P1/14(2006.01)I;A61K125/00(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 劉淑瑩;黃 鑫;劉志強(qiáng);宋鳳瑞;王淑敏 |
| 地址 | 130022吉林省長春市人民大街5625號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 長春科宇專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 馬守忠 |
| 國省代碼 | 吉林;22 |
| 主權(quán)項 | 一種中藥膜莢黃芪的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步驟和條件如下： (1)供試樣品溶液制備 本發(fā)明選擇50％-100％(V/V)的乙醇作為溶媒，將中藥膜莢黃芪粉碎，過40-60目篩，稱取已粉碎的中藥膜莢黃芪5-10g于200ml錐形瓶中，加50％-100％(V/V)的乙醇50-100ml，通過超聲提取1-3次，20-40min/次，超聲提取溫度20-60℃；合并上述提取液并濃縮，水定容至10ml容量瓶中，即為樣品溶液a，飽和正丁醇萃取樣品溶液a 2-4次，20-40ml/次，分別合并各次萃取的正丁醇溶液，減壓蒸干，殘渣以甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中，搖勻，即為供試樣品溶液； (2)供試樣品的電噴霧指紋圖譜 供試樣品的電噴霧指紋圖譜通過如下步驟得到：取5-10μl的供試樣品溶液，用甲醇稀釋至100-500μl，作電噴霧質(zhì)譜分析，電噴霧質(zhì)譜實驗條件如下：電噴霧離子源，噴霧電壓3.5-5.5kV，毛細(xì)管溫度180-220℃，流動注入泵進(jìn)樣流速2-8μl/min；掃描范圍質(zhì)荷比(m/z)50-2000，利用正離子模式電噴霧質(zhì)譜確認(rèn)皂苷、黃酮的種類； (3)總皂苷含量測定 總皂苷含量測定的方法：精密稱取干燥的黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品50mg，用無水乙醇溶解并定容至10ml容量瓶中，搖勻，即為黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液，備用；香草醛配成8％乙醇溶液；硫酸配成72％(V/V)溶液；用移液槍精密移取黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液0、15、30、45、60、75μl及10μl供試樣品溶液分別置于七個10ml具塞試管中，分別加入無水乙醇至2ml，再分別加入0.5ml的8％香草醛乙醇試劑，在冰水浴中加入7.5ml 72％(V/V)硫酸溶液，搖勻，于62℃水浴保溫20min，取出，搖勻，作為待測溶液；在30min內(nèi)，于530-560nm波長處測定待測溶液的吸光度，以黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液的吸光度(A)為縱坐標(biāo)，對應(yīng)黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品濃度(C)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得到黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和線性回歸方程，然后根據(jù)供試樣品溶液的吸光度和得到的黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對照品的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，測得供試樣品中總皂苷的含量； (4)總黃酮含量測定 總黃酮含量測定：精密稱量約10mg的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品，用60％乙醇溶解并定容至25ml容量瓶中，搖勻，即為蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液，備用；用移液槍精密移取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液0、20、40、60、80、100μl及25μl供試樣品溶液分別置于七個25ml容量瓶中，分別加入5％亞硝酸鈉溶液0.2ml，搖勻，靜置6min，再分別加入10％硝酸鋁溶液0.2ml，搖勻，靜置6min，再分別加入4％氫氧化鈉溶液1ml，加60％乙醇定容至刻度，搖勻，靜置15min，作為待測溶液；于490-510nm波長處測定待測溶液的吸光度，以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液的吸光度(A)為縱坐標(biāo)，對應(yīng)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品濃度(C)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得到蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和線性回歸方程，然后根據(jù)供試樣品溶液的吸光度和得到的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，測得供試樣品中總黃酮的含量，完成一種中藥膜莢黃芪的質(zhì)量檢測方法。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種中藥膜莢黃芪的質(zhì)量檢測方法。利用粉碎、過篩、乙醇提取、過濾、水飽和正丁醇萃取、濃縮、定容等樣品前處理手段將中藥膜莢黃芪處理后，通過電噴霧質(zhì)譜得到中藥膜莢黃芪中總皂苷、總黃酮的指紋圖譜，根據(jù)其指紋圖譜確定中藥膜莢黃芪中所含的皂苷、黃酮的種類；利用紫外-可見分光光度計測定中藥膜莢黃芪中總皂苷、總黃酮的含量。綜合其指紋圖譜及含量測定數(shù)據(jù)，可以對中藥膜莢黃芪的質(zhì)量進(jìn)行評價。該質(zhì)量檢測方法準(zhǔn)確、快捷、方便、有效。 |
| 國際公布 |
