川貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)－限制性酶切圖譜鑒定方法
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公開(公告)號
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CN1227358C
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公開(公告)日
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2005.11.16
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申請(專利)號
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CN03131798.7
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申請日期
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2003.07.30
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專利名稱
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川貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)－限制性酶切圖譜鑒定方法
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主分類號
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C12N15/10
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分類號
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C12N15/10;C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國藥科大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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李 萍;王沖之
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地址
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210038江蘇省南京市神農(nóng)路1號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識律師事務(wù)所
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代理人
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胡錫瑜
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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用于鑒別川貝母的PCR擴(kuò)增引物對，其特征在于：該引物對為P1：5’-CGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAA-3’；P2：5’-GCTACGTTCTTCATCGAT-3’。
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摘要
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本發(fā)明屬于中藥材種質(zhì)的品質(zhì)鑒定技術(shù)領(lǐng)域，目的是提供一種準(zhǔn)確鑒別川貝母與非川貝母類藥材的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜分子鑒定方法(PCR-RFLP)。PCR擴(kuò)增所用引物序列為：P1：5’-CGT AAC AAG GTT TCC GTA GGTGAA-3’，P2：5’-GCT ACG TTC TTC ATC GAT-3’；川貝母的特征DNA堿基序列為：5’-TGCCCGCCCT GCCCGGGACC TCGC-3’；限制性內(nèi)切酶Sma I及其同切酶可識別并切割該序列。鑒定過程如下：提取藥材DNA；用引物P1、P2進(jìn)行PCR擴(kuò)增；用限制性內(nèi)切酶Sma I或其同切酶消化PCR產(chǎn)物；瓊脂糖凝膠電泳分析結(jié)果；通過與川貝母PCR-RFLP特征結(jié)果相比較，即可判斷供試品是否川貝母藥材。
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國際公布
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