公開(公告)號
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CN1117858C
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公開(公告)日
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2003.08.13
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申請(專利)號
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CN00103431.6
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申請日期
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2000.03.10
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專利名稱
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乙型肝炎病毒核心基因和前S1區(qū)基因轉(zhuǎn)染的小鼠靶細(xì)胞系及其應(yīng)用
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主分類號
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C12N5/10
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分類號
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C12N5/10;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/63;C12N15/85
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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趙陽青;詹美云
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地址
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100052北京市宣武區(qū)迎新街100號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京三高永信專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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姚寶琴
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種乙型肝炎病毒核心基因編碼1-144aa基因和前S1基因編碼1-42aa基因轉(zhuǎn)染小鼠P815細(xì)胞后獲得的靶細(xì)胞系P99-815,其特征是:乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因均來源于含雙拷貝的首尾相連的HB V-DNA ayw亞型的質(zhì)粒p THB V-1,乙型肝炎病毒核心基因片段和前S1基因片段是從已構(gòu)建成功的原核表達(dá)載體p ET-11d CS1切下后,再與真核表達(dá)載體pC DNA 3構(gòu)建成pC DNA 3 CS1質(zhì)粒,再將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞P815,通過G418篩選獲得表達(dá)外源基因的細(xì)胞系。
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摘要
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本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域,涉及乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因轉(zhuǎn)染而成的小鼠靶細(xì)胞系P99-815的建立,是乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因均來源于含雙拷貝的首尾相連的HBV-DNA ayw亞型的質(zhì)粒p THBV-1,乙型肝炎病毒核心基因片段和前S1基因片段是從已構(gòu)建成功的原核表達(dá)載體p ET-11dCS1切下后,再與真核表達(dá)載體pC DNA3構(gòu)建成pC DNA3CS1質(zhì)粒,再將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞P815,要解決目的基因的分離、連接、克隆、鑒定、構(gòu)建含目的基因的真核表達(dá)載體、轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞P815的技術(shù),表達(dá)外源基因細(xì)胞的篩選、克隆、以及保存條件的研究等。該細(xì)胞系可以用于治療和預(yù)防乙型肝炎藥物的評價(jià),對誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)細(xì)胞免疫水平檢測時(shí),用此細(xì)胞作為靶細(xì)胞。
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國際公布
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