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自身免疫病相關(guān)蛋黃抗體制備方法及其應(yīng)用

公開(公告)號 CN1438244A  
公開(公告)日 2003.08.27  
申請(專利)號 CN02158337.4  
申請日期 2002.12.21  
專利名稱 自身免疫病相關(guān)蛋黃抗體制備方法及其應(yīng)用  
主分類號 C07K16/02  
分類號 C07K16/02;A61K39/395;A61P37/02;A61P3/10;A61P5/16;A61P19/04;A61P7/06;G01N33/577  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 郭占軍  
發(fā)明(設(shè)計)人 郭占軍;趙華;楊巧芝;金維良  
地址 252000山東省聊城市文化路1號市中醫(yī)院  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機構(gòu)  
代理人  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項 一種自身免疫病相關(guān)蛋黃抗體制備方法,其特征在于:以產(chǎn)蛋禽類尤其是雞作為免疫反應(yīng)器,用一種或多種純化或通過基因工程技術(shù)重組的自身免疫病特異性抗原或疫苗、或細(xì)胞因子靶向抗原、或自身免疫病特異性DNA或mRNA及其與相應(yīng)載體組成的重組體、或針對于自身免疫病特異性抗原或細(xì)胞因子靶向抗原的單克隆或多克隆抗體、或它們的脂質(zhì)體或納米微粒復(fù)合物作為免疫原,分別單獨進(jìn)行或多種聯(lián)合進(jìn)行禽類尤其是雞的多次重復(fù)免疫注射,然后再以不完全佐劑進(jìn)行追加強化反應(yīng),待5-20天后禽類尤其是雞的產(chǎn)蛋中即有針對于上述自身免疫病相關(guān)免疫原的多克隆抗體IgY、抗獨特型抗體Ab2α、Ab2β、Ab2γ和Ab2ε、自身免疫病特異性表達(dá)抗原中的任一種或其組合物存在和儲存。其具體步驟包括:a)自身免疫病相關(guān)免疫原或其組合物進(jìn)行多次免疫注射禽類優(yōu)選為雞。在此所述的免疫原是采用純化的自身免疫病相關(guān)抗原或通過基因工程技術(shù)重組的自身免疫病特異性抗原或疫苗、細(xì)胞因子靶向抗原、通過提取純化的自身免疫病特異性裸DNA或mRNA及其與相應(yīng)載體組成的重組體、自身免疫病特異性抗原和細(xì)胞因子靶向抗原的單克隆或多克隆抗體,另外還包括上述自身免疫病相關(guān)免疫原的脂質(zhì)體微粒甚至是納米微粒的免疫注射,借助于脂質(zhì)體對組織和細(xì)胞的親和性以強化免疫效果;所述禽類包括雞、鴨、鵝、鵪鶉,首選是雞;注射部位包括肌肉、皮下、皮內(nèi)、血管和生殖腔囊;注射方法包括將上述自身免疫病相關(guān)免疫原單獨進(jìn)行注射和多種自身免疫病相關(guān)免疫原聯(lián)合進(jìn)行多次重復(fù)免疫注射,其中所述的多種自身免疫病相關(guān)免疫原聯(lián)合進(jìn)行免疫注射包括用不同種類和來源的自身免疫病相關(guān)抗原、基因重組自身免疫病特異性抗原或疫苗、細(xì)胞因子靶向抗原、自身免疫病特異性裸DNA或mRNA及其重組體中的任一種或其組合物;還包括不同種類和來源的自身免疫病相關(guān)抗原和細(xì)胞因子靶向抗原的特異性單克隆或多克隆抗體中的任一種或其組合物;所述的免疫原注射量為1-2ml(免疫原量10-500μg/ml+等量不完全福氏佐劑,其中抗體Ab1的用量為100~2000μg/ml+等量不完全福氏佐劑);所述的自身免疫病相關(guān)抗原包括蛋白質(zhì)、多肽、粘多糖、脂多糖、糖蛋白、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞表面受體、核蛋白、DNA、RNA、線粒體、微粒體中的任一種或其組合;所述細(xì)胞因子靶向抗原包括人類白細(xì)胞分化抗原CD、粘附分子、補體、細(xì)胞因子及其受體、免疫球蛋白超家族中的任一種或其組合;所述細(xì)胞因子及其受體包括白細(xì)胞介素(IL)及其受體、集落刺激因子(CSF)及其受體、腫瘤壞死因子(TNF)及其受體、趨化因子及其受體中的任一種或其組合;所述自身免疫病包括多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑瘡、混合結(jié)締組織病、胰島素依賴性糖尿病、自身免疫性溶血性貧血、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、橋本甲狀腺炎干燥綜合征等疾病中的任一種或其復(fù)合病。b)上述自身免疫病相關(guān)免疫原用不完全佐劑進(jìn)行追加免疫反應(yīng)。c)待5-20天后禽類尤其是雞的產(chǎn)蛋中即有針對于上述自身免疫病相關(guān)免疫原的蛋黃抗體存在和儲存。其中所述的蛋黃抗體包括針對于上述自身免疫病相關(guān)抗原、重組自身免疫病相關(guān)抗原或疫苗、細(xì)胞因子靶向抗原或其脂質(zhì)體或納米微粒的蛋黃多克隆抗體IgY中的任一種或其組合物;針對于自身免疫病特異性裸DNA或mRNA及其重組體或其脂質(zhì)體或納米微粒的自身免疫病特異性表達(dá)抗原中的任一種或其組合物;針對于自身免疫病相關(guān)抗原和細(xì)胞因子靶向抗原的特異性單克隆或多克隆抗體或上述蛋黃多克隆抗體IgY或其脂質(zhì)體或納米微粒的抗獨特型抗體Ab2α、Ab2β、Ab2γ和Ab2ε中的任一種或其組合物。  
摘要 本發(fā)明涉及一種自身免疫病相關(guān)蛋黃抗體尤其是針對于自身免疫病免疫原的蛋黃多克隆抗體IgY、抗獨特型抗體和自身免疫病特異性表達(dá)抗原的制備方法,另外還涉及該蛋黃抗體的用途。本發(fā)明以產(chǎn)蛋禽類尤其是雞作為免疫反應(yīng)器,用一種或多種自身免疫病免疫原進(jìn)行免疫注射,特點是多種自身免疫病免疫原單獨或多種聯(lián)合進(jìn)行免疫注射,其產(chǎn)蛋中即有針對于上述自身免疫病免疫原的多克隆抗體IgY或抗獨特型抗體或自身免疫病特異性表達(dá)抗原中的任一種或其組合物存在和儲存。具有成本低、產(chǎn)量高、特異性強、決定簇廣并能進(jìn)行集約化大規(guī)模生產(chǎn)的優(yōu)點,尤其是能避免HAMA反應(yīng)和異質(zhì)性問題。適用于自身免疫病的免疫診斷、治療和預(yù)防。  
國際公布  
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