一類雙鏈RNA分子及其在制備抑制乙型肝炎病毒復制藥物中的應用
公開(公告)號
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CN1488761A
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公開(公告)日
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2004.04.14
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申請(專利)號
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CN03142232.2
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申請日期
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2003.08.13
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專利名稱
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一類雙鏈RNA分子及其在制備抑制乙型肝炎病毒復制藥物中的應用
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主分類號
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C12P19/34
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分類號
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C12P19/34;C12N15/70;A61K31/7088;A61P1/16;A61P31/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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復旦大學;上海恒達科技發(fā)展股份有限公司
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發(fā)明(設計)人
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錢志康;宣寶琴;徐劍鋒;李琳
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地址
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200433上海市邯鄲路220號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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上海正旦專利代理有限公司
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代理人
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陸飛
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國省代碼
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上海;31
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主權項
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一種利用大腸桿菌發(fā)酵制備用RNAi用ldsRNA和siRNA分子的方法,其特征在于包括構建ldsRNA表達載體,并轉化大腸桿菌宿主菌,通過大規(guī)模發(fā)酵,用堿-SDS法抽提發(fā)酵菌體得到全RNA和質粒DNA的混合物;該混合物用CF-11柱進行純化得到ldsRNA,并利用大腸桿菌RNase III將ldsRNA切成12-30bp的siRNA。
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摘要
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本發(fā)明屬于分子生物學與生物醫(yī)藥技術領域,具體為一種利用大腸桿菌發(fā)酵制備RNA干擾用雙鏈RNA分子或小干擾RNA分子的方法,并將這些RNA分子用于制備治療乙型肝炎的藥物。將本發(fā)明得到的ldsRNA或siRNA以適當的比例與乙型肝炎病毒表達載體混合,并用尾靜脈液壓法注射到小鼠體內。結果顯示非同源性序列l(wèi)dsRNA和siRNA基本不抑制乙型肝炎病毒在小鼠體內的復制,而與乙肝病毒基因同源性的ldsRNA和siRNA可以有效抑制乙型肝炎病毒在小鼠體內的感染復制,抑制率高達90%以上。
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國際公布
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