| 公開(公告)號 | CN1171991C |
| 公開(公告)日 | 2004.10.20 |
| 申請(專利)號 | CN02134313.6 |
| 申請日期 | 2002.07.08 |
| 專利名稱 | 人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法 |
| 主分類號 | C12N5/00 |
| 分類號 | C12N5/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 徐如祥;姜曉丹 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 徐如祥;姜曉丹 |
| 地址 | 510282 廣東省廣州市工業(yè)大道253號珠江醫(yī)院神經(jīng)外科 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州知友專利代理有限公司 |
| 代理人 | 宣國華 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于由以下步驟組成：(1)配制人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的配制步驟為：a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，加純凈水至濃度為10～25g/L，并充分?jǐn)嚢枞芙�，制得�?xì)胞的一般基礎(chǔ)培養(yǎng)液；b、再取胰島素、L-谷氨酰胺、鹽酸丁二胺、硒化鈉、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、氫化可的松、黃體酮依次加入基礎(chǔ)培養(yǎng)液中，充分?jǐn)嚢杈鶆颍籧、以1～10當(dāng)量濃度的氫氧化鈉調(diào)pH為7.4～8.0；d、層流細(xì)胞培養(yǎng)室抽濾消毒，4℃儲(chǔ)存?zhèn)溆茫?2)取步驟1配制出的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基，取新鮮血清加入培養(yǎng)基中，血清的含量為培養(yǎng)基的5～20％；將加入血清的培養(yǎng)基置于培養(yǎng)箱，在35℃～38℃、加3～7％的CO2溫箱孵育11～21天。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胰島素、鹽酸丁二胺、硒化鈉、氫化可的松、L-谷氨酰胺、人轉(zhuǎn)鐵蛋白和黃體酮組成的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基；2、即時(shí)采集病員本人自體血清；3、將采集的病員本人自體血清加入配制出的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基中，在35℃～38℃、加3～7％的CO2溫箱孵育。本發(fā)明方法簡單，可重復(fù)性強(qiáng)，操作簡便易行；為有關(guān)神經(jīng)干細(xì)胞及其應(yīng)用的科研、教學(xué)、臨床應(yīng)用等能起到不可估量的作用，同時(shí)也孕育著巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。 |
| 國際公布 |
