| 公開(公告)號 | CN1195868C |
| 公開(公告)日 | 2005.04.06 |
| 申請(專利)號 | CN00129579.9 |
| 申請日期 | 2000.10.08 |
| 專利名稱 | 一種體外免疫人B淋巴細胞生產(chǎn)人單克隆抗體的方法 |
| 主分類號 | C12P21/08 |
| 分類號 | C12P21/08 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 于永利 |
| 發(fā)明(設計)人 | 于永利 |
| 地址 | 100086 北京市海淀區(qū)海淀路169號興發(fā)大廈510室北京迪威仁方生物技術有限公司 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權代理有限公司 |
| 代理人 | 張濤 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權項 | 一種體外生產(chǎn)人源化單克隆抗體的方法，其特征在于用加載抗原的人樹突狀細胞免疫人外周血單個核細胞，然后用EB病毒轉(zhuǎn)化其中的生產(chǎn)特異性抗體的B淋巴細胞，以生產(chǎn)針對上述抗原的特異性人源化單克隆抗體；進一步，其特征在于該方法包括以下步驟：(1)分離、培養(yǎng)與鑒定人樹突狀細胞；(2)應用抗原加載由上述步驟(1)得到的人樹突狀細胞；(3)分離人外周血單個核細胞；(4)應用由上述步驟(2)得到的加載抗原的人樹突狀細胞免疫由上述步驟(3)得到的人B淋巴細胞；(5)應用EB病毒轉(zhuǎn)化由上述步驟(4)得到的被免疫的人B淋巴細胞；(6)克隆化培養(yǎng)由上述步驟(5)得到的轉(zhuǎn)化細胞；(7)應用ELISA方法篩選由上述步驟(6)得到的生產(chǎn)針對上述抗原的特異性單克隆抗體的轉(zhuǎn)化細胞克��；(8)擴增、保存由上述步驟(7)得到的生產(chǎn)上述特異性單克隆抗體的B淋巴細胞；(9)培養(yǎng)由上述步驟(8)得到的生產(chǎn)上述特異性人單克隆抗體的B淋巴細胞；(10)分離純化由上述步驟(9)得到的針對上述抗原的特異性人源化單克隆抗體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種用加載抗原的人樹突狀細胞體外免疫人外周血單個核細胞，然后用EB病毒轉(zhuǎn)化其中的生產(chǎn)特異性抗體的B淋巴細胞進而生產(chǎn)針對上述抗原的人源化單克隆抗體的方法。使用本發(fā)明所提供的方法可獲得生產(chǎn)針對上述抗原的人源化單克隆抗體的人B淋巴細胞克隆，培養(yǎng)這些人B淋巴細胞就可生產(chǎn)針對各種抗原的、具有臨床治療和臨床診斷價值的人源化單克隆抗體。本方法既適用于在實驗室水平制備人單克隆抗體，也適用于人單克隆抗體的工業(yè)化生產(chǎn)。 |
| 國際公布 |
