| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1706940A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2005.12.14 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) | CN200410046398.9 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.06.09 |
| 專(zhuān)利名稱(chēng) | 重組人超氧化物歧化酶的提取方法 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C12N9/02 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N9/02;C12N1/21 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 唐志泉 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 唐志泉;侯偉文;李如華 |
| 地址 | 100000北京市平谷開(kāi)發(fā)區(qū)府前路21號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) | 北京匯澤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 閆立德 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組人超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于該方法包括下列步驟；(1)將含有人體SOD基因的PCR252載體的大腸桿菌接種子培養(yǎng)基中，在32℃的溫度下，發(fā)酵培養(yǎng)24小時(shí)，再加入占發(fā)酵液重量1％的硫酸銅清液，再向發(fā)酵液加入3倍體積的去離子水，用震動(dòng)式破碎機(jī)劇烈震動(dòng)破碎30min，靜置20min，置入每分鐘2000轉(zhuǎn)的離心機(jī)中，離心分離，除去沉淀雜質(zhì)，得清澈透明粗酶液；(2)將粗酶液置入純酶儀中分離，去雜質(zhì)，再加入4℃的等量體積的去離子水，超濾濃縮，得等量體積50％的SOD的粗抽提液，再向粗抽提液中加入等量4℃的冷丙酮，分級(jí)沉淀，去除底部雜質(zhì)，得SOD濃縮液；(3)將SOD濃縮液用2倍體積的去離子水溶解，再次置入每分鐘2000轉(zhuǎn)的離心機(jī)中，離心分離，除去沉淀雜質(zhì)，得SOD濃縮清液，將濃縮清液4℃冷凍48小時(shí)靜止后，除去沉淀雜質(zhì)，超濾濃縮，冷凍干燥，即得藥用SOD凍干品，該產(chǎn)品酶活性為8000U～15000U/mg。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于一種重組人超氧化物歧化酶的提取方法，該方法將含有人體SOD基因的PCR252載體的大腸桿菌接種子培養(yǎng)基中，發(fā)酵培養(yǎng)，再向發(fā)酵液加入去離子水，用震動(dòng)破碎，離心分離，除去沉淀雜質(zhì)，超濾濃縮，再向粗抽提液中加入冷丙酮，分級(jí)沉淀，再次離心分離，除去沉淀雜質(zhì)，超濾濃縮，冷凍干燥，即得藥用SOD凍干品，該產(chǎn)品酶活性為8000U～15000U/mg，本發(fā)明采用生物基因復(fù)制技術(shù)，克服超氧化物歧化酶帶有病毒的隱患，使其具有簡(jiǎn)單的工藝，較低的加工成本，提取時(shí)間短和提取率高的優(yōu)點(diǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
