| 公開(公告)號 | CN1234720C |
| 公開(公告)日 | 2006.01.04 |
| 申請(專利)號 | CN98813011.4 |
| 申請日期 | 1998.11.06 |
| 專利名稱 | 記錄蛋白質(zhì)相互作用及功能關(guān)系的檢測系統(tǒng) |
| 主分類號 | C07H21/04(2006.01)I |
| 分類號 | C07H21/04(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1997.11.10 US 60/065273 |
| 申請(專利權(quán))人 | 綜合醫(yī)院公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | R·布倫特;C·W·徐;A·R·門德爾松;W·L·洛克 |
| 地址 | 美國馬薩諸塞州 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 1998-11-06 PCT/US1998/023696 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2000.07.10 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 張廣育;周慧敏 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項 | 一種檢測蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的方法，該方法包含：(a)提供一個宿主細(xì)胞，它含有(i)一個第一報道基因，其可通過操作與包括第一蛋白質(zhì)結(jié)合位點的DNA序列相連；(ii)一個第二報道基因，其可通過操作與包括第二蛋白質(zhì)結(jié)合位點的DNA序列相連；(iii)一個表達(dá)第一融合蛋白的第一融合基因，所述第一融合蛋白包括一個與結(jié)合部分共價結(jié)合的第一蛋白質(zhì)，該結(jié)合部分能特異性結(jié)合到所述第一蛋白質(zhì)結(jié)合位點上；(iv)一個表達(dá)第二融合蛋白的第二融合基因，所述第二融合蛋白包括一個與結(jié)合部分共價結(jié)合的第二蛋白質(zhì)，該結(jié)合部分能特異性結(jié)合到所述第二蛋白質(zhì)結(jié)合位點上；和(v)一個表達(dá)第三融合蛋白的第三融合基因，所述第三融合蛋白包括一個與基因活化部分共價結(jié)合的第三蛋白質(zhì)；(b)測量所述第一報道基因的表達(dá)輸出，作為所述第一蛋白質(zhì)和第三蛋白質(zhì)之間相互作用的量度；(c)測量所述第二報道基因的表達(dá)輸出，作為所述第二蛋白質(zhì)和第三蛋白質(zhì)之間相互作用的量度；(d)解釋步驟(b)和步驟(c)的表達(dá)輸出結(jié)果，由此(i)所述第一報道基因和第二報道基因二者輸出的增加指示所述第三融合蛋白與所述第一和第二融合蛋白相互作用；(ii)所述第一報道基因輸出增加而第二報道基因輸出不增加，指示所述第三融合蛋白與第一融合蛋白相互作用，而不與第二融合蛋白作用；(iii)所述第二報道基因輸出增加而第一報道基因輸出不增加，指示所述第三融合蛋白與第二融合蛋白相互作用，而不與第一融合蛋白作用；和(iv)所述第一或第二報道基因的輸出均沒有變化，指示所述第三融合蛋白不與所述第一或第二融合蛋白相互作用；(e)將所述步驟(b)和步驟(c)的表達(dá)輸出結(jié)果與用下述宿主細(xì)胞測得的表達(dá)輸出結(jié)果進(jìn)行比較，所述宿主細(xì)胞是(i)一個第一比較宿主細(xì)胞，它含有(a)一個可通過操作與包括蛋白質(zhì)結(jié)合位點的DNA序列相連的報道基因；(b)一個表達(dá)第一融合蛋白的第一融合基因，所述第一融合蛋白包括與能特異性結(jié)合到所述蛋白質(zhì)結(jié)合位點上的結(jié)合部分共價結(jié)合的所述第一蛋白質(zhì)；和(c)一個表達(dá)第二融合蛋白的第二融合基因，所述第二融合蛋白包括與基因活化部分共價結(jié)合的所述第三蛋白質(zhì)；或者(ii)一個第二比較宿主細(xì)胞，它含有(a)可通過操作與包括蛋白質(zhì)結(jié)合位點的DNA序列相連的報道基因；(b)一個表達(dá)第一融合蛋白的第一融合基因，所述第一融合蛋白包括與能特異性結(jié)合到所述蛋白質(zhì)結(jié)合位點上的結(jié)合部分共價結(jié)合的所述第二蛋白質(zhì)；和(c)一個表達(dá)第二融合蛋白的第二融合基因，所述第二融合蛋白包括與基因活化部分共價結(jié)合的所述第三蛋白質(zhì)；或者(iii)所述第一比較宿主細(xì)胞和所述第二比較宿主細(xì)胞兩者。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了復(fù)雜蛋白質(zhì)相互作用和蛋白質(zhì)功能關(guān)系的檢測方法，以及實施這些方法所用的試劑。 |
| 國際公布 | 1999-05-20 WO1999/024455 英 |
