| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1238523C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2006.01.25 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410008726.6 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.03.16 |
| 專利名稱 | 用基因靶標(biāo)篩選具有降低血脂中膽固醇組分的方法 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 信學(xué)雷;李維琪;陳志慧;劉云英;麥迪娜;張?jiān)品? |
| 地址 | 830011新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市北京南路40號(hào)附1號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 烏魯木齊中科新興專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 張 莉 |
| 國(guó)省代碼 | 新疆;65 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種用基因靶標(biāo)篩選具有降低血脂中膽固醇組分的方法，其特征在于，按下例步驟進(jìn)行：a、采用常規(guī)獲得目的基因的方法，獲得載脂蛋白ApoAI和清道夫受體SR-BI基因，并且將其作為藥物篩選靶標(biāo)；b、采用常規(guī)方法將載脂蛋白ApoAI和清道夫受體SR-BI基因構(gòu)建酵母載體，利用酵母雙雜交系統(tǒng)，并用報(bào)告基因和酵母交配證實(shí)相互作用的存在；c、選擇酵母雙雜交系，用正常的菌株或交配的二倍體菌株檢驗(yàn)具有降低血脂中膽固醇組分的毒性，只有對(duì)酵母菌株生長(zhǎng)影響不大時(shí)才能用于檢測(cè)；d、以報(bào)告基因所表達(dá)的α、β-半乳糖苷酶定量檢測(cè)了載脂蛋白ApoAI和清道夫受體SR-BI間存在相互作用強(qiáng)弱，運(yùn)用已知降脂藥及在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證明有效的藥物為陽(yáng)性對(duì)照，檢驗(yàn)該篩藥系統(tǒng)的有效性，定量地比較各種組分在降低血脂中膽固醇能力的差別。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種用基因靶標(biāo)篩選具有降低血脂中膽固醇組分的方法，該方法首先從大鼠肝臟總RNA用RT-PCR方法獲得了wistar大鼠的載脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受體(SR-BI)基因的全長(zhǎng)cDNA，并將其克隆入酵母表達(dá)載體，利用報(bào)告基因、省卻培養(yǎng)基、酵母交配證實(shí)了在載脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受體(SR-BI)間存在相互作用，以報(bào)告基因所表達(dá)的α、β-半乳糖苷酶定量檢測(cè)了載脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受體(SR-BI)間存在相互作用強(qiáng)弱，并運(yùn)用在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證明有效的藥物為陽(yáng)性對(duì)照，檢驗(yàn)了該方法，證明該方法有效，可用于在基因水平上篩選和評(píng)價(jià)具有調(diào)脂效果的關(guān)鍵組分。該方法成本低廉，高效準(zhǔn)確，又可部分揭示了藥物降低膽固醇的作用機(jī)理。 |
| 國(guó)際公布 |
