公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN100341895C
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公開(kāi)(公告)日
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2007.10.10
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN98121937.3
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申請(qǐng)日期
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1998.10.08
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專利名稱
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哺乳動(dòng)物心肌中提取酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子樣物質(zhì)的方法
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主分類號(hào)
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C07K14/50(2006.01)I
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分類號(hào)
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C07K14/50(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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張建軍
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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張建軍
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地址
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200434上海市萬(wàn)安路1213弄64號(hào)101室
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
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代理人
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左一平
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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哺乳動(dòng)物心肌中提取酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子樣物質(zhì)的方法,其特征在于:包括如下步驟:(1)在哺乳動(dòng)物心臟組織塊中加入酸性抽提液后,將哺乳動(dòng)物心臟組織塊進(jìn)行勻漿化;所述的酸性抽提液為0.15mol/l硫酸銨溶液,其中含0.5~1.0mmol/l的苯甲基磺酰氟(PMSF);(2)對(duì)抽提后得到的上清液用固體硫酸銨進(jìn)行兩次鹽析沉淀;(3)將沉淀后得到的粗提物用截留值為8000~12000分子量的透析袋進(jìn)行透析;(4)對(duì)透析得到的上清液進(jìn)行柱層析和柱親和層析分離。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種從哺乳動(dòng)物心肌中提取酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子樣物質(zhì)的方法,在抽提液中分別加入了抑肽酶和苯甲基磺酰氟(PMSF),并采用連續(xù)肝素親和層析技術(shù),采用聚乙二醛低溫高滲濃縮提取物,簡(jiǎn)化了提取工藝。從哺乳動(dòng)物心肌中提取的aFGF樣的物質(zhì),具有得率高、生物活性好的特點(diǎn)。以從牛心肌中提取aFGF樣的物質(zhì)為例,經(jīng)檢測(cè):由120~136個(gè)氨基酸組成,分子量為13KDa以上,得率為每公斤400~600ug,ED50值為38~100ng。解決了aFGF來(lái)源困難的問(wèn)題,可作為治療多種疾病的藥物的原材料。
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國(guó)際公布
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