| 公開(公告)號 | CN1782075A |
| 公開(公告)日 | 2006.06.07 |
| 申請(專利)號 | CN200410073166.2 |
| 申請日期 | 2004.10.11 |
| 專利名稱 | 基因工程重組二連體骨形成蛋白的設計構建方法 |
| 主分類號 | C12N15/11(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/11(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 陳蘇民;梁克明;秦 云;陳南春 |
| 地址 | 710049陜西省西安市長樂西路15號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 西安通大專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 孫 楓 |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權項 | 基因工程重組二連體骨形成蛋白的設計構建方法，其特征在于：用基因工程手段，將2個BMP成熟肽間的雙硫鍵(-S-S-)改為以肽鍵(-CO-NH-)相連接，即將編碼BMP成熟肽截短或?qū)⒏痰腂MP肽段的cDNA放在大腸桿菌中表達，使BMP成熟肽在內(nèi)部正確形成3對雙硫健，在BMP成熟肽的鏈間以肽健相連接而成為BMP二連體以及經(jīng)在體外純化、復性后折疊成為有活性的BMP。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及基因工程重組二連體骨形成蛋白的設計構建方法，其特征是用基因工程手段構建“重組人BMP成熟肽二連體”，基本方法是將編碼BMP成熟肽的cDNA放在大腸桿菌中表達，使BMP成熟肽在內(nèi)部正確形成3對雙硫鍵，在BMP成熟肽的鏈間以肽鍵相連接而成為BMP二連體以及經(jīng)在體外純化復性后折疊成為有活性的BMP；半胱氨酸突變的過程需要加入限制性核酸內(nèi)切酶位點序列和起始碼，并需要PCR的擴增引物；引物根據(jù)需要可設計為不同DNA序列；本發(fā)明提供了用基因工程的手段使大腸桿菌直接表達類似二聚體結構的有活性的重組二連體骨形成蛋白及其制備方法，以期用廉價的大腸桿菌基因工程系統(tǒng)去大量生產(chǎn)具有良好生物活性的各種BMP。 |
| 國際公布 |
